Journal
/
Neurosciences
/
Pålidelig Identifikation af Living dopaminerge neuroner i midthjernen Cultures Brug RNA Sequencing og TH-promotor-drevet eGFP Expression
Journal JoVE
Neurosciences
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Neurosciences
Reliable Identification of Living Dopaminergic Neurons in Midbrain Cultures Using RNA Sequencing and TH-promoter-driven eGFP Expression

Pålidelig Identifikation af Living dopaminerge neuroner i midthjernen Cultures Brug RNA Sequencing og TH-promotor-drevet eGFP Expression

DOI:
10.3791/54981-v

•

10:54 min

•

February 10, 2017

•

, , , , , , ,
1Division of Biology and Biological Engineering,California Institute of Technology (Caltech)

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
  • 02:55Dissociation and Plating of Cells
  • 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
  • 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
  • 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
  • 09:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Ved Parkinsons sygdom (PD), sorte substans (SNC) dopaminerge neuroner degenerere, hvilket fører til motorisk dysfunktion. Her rapporterer vi en protokol til dyrkning ventrale midthjernen neuroner fra en mus, der udtrykker eGFP drevet af en tyrosinhydroxylase (TH) promotorsekvens, høst individuelle fluorescerende neuroner fra kulturerne, og måling af deres transkriptom anvendelse af RNA-seq.

Tags

Keywords: RNA SequencingTyrosine HydroxylaseEGFPDopaminergic NeuronsMidbrain CulturesParkinson’s DiseaseDrug AddictionVentral MesencephalonVentral Tegmental AreaSubstantia NigraDissection

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/54981?article_type=v

Application of a NMDA Receptor Conductance in Rat Midbrain Dopaminergic Neurons Using the Dynamic Clamp Technique
check_url/fr/54981?article_type=v

Organotypiske Slice Kulturer af Embryonale ventrale midthjernen: et system til undersøgelse Dopaminerge Neuronal Udvikling In vitro</em
check_url/fr/54981?article_type=v

I ovo Elektroporation i Chick midthjernen for at studere genfunktion i dopaminerg Neuron Development
check_url/fr/54981?article_type=v

I ovo Angivelse af MicroRNA i Ventral Chick Midbrain
check_url/fr/54981?article_type=v

Vurdere Neurodegenerative fænotyper i<em> Drosophila</em> Dopaminerge neuroner ved at klatre assays og Whole Brain-immunfarvning
check_url/fr/54981?article_type=v

Primær Kultur Mouse dopaminerge neuroner
check_url/fr/54981?article_type=v

Miljømæssige Modulationer i antallet af Midbrain dopaminneuroner i voksne mus
check_url/fr/54981?article_type=v

Ekstern ekspression af neuroner ved hjælp af elektriske og magnetiske felter i en- og todimensionelle kulturer
check_url/fr/54981?article_type=v

Bestemmelse af celleoverfladeekspression og endocytisk proteinhastighed i primære astrocytkulturer ved anvendelse af biotinylering
check_url/fr/54981?article_type=v

Encellede RNA sekventering af Fluorescently mærket mus neuroner ved hjælp af manuel sortering og dobbelt In Vitro transskription med absolut tæller sekventering (DIVA-Seq)

Read Article