Denne protokollen beskriver en detaljert metodikk for å oppdage H2O2 lokalisering i Solea senegalensis spermatozoa bruker en følsom fluorochrome DCFH-DA for ROS, en live mitokondrier flekk for mitokondrier og DAPI for kjerner visualisering, henholdsvis. Protokollen er utformet som skal utføres innen 2 timer med enten friske eller tinte spermatozoa.