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Reconstitution de nucléosomes avec histones soeurs Différentiellement Isotope marqués
Journal JoVE
Biochimie
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Reconstitution of Nucleosomes with Differentially Isotope-labeled Sister Histones
DOI:

09:26 min

March 26, 2017

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:03Reconstitution of a Histone Octamer with Differentially Isotope-labeled and Asymmetrically-modified Histone H3
  • 03:20Tandem Affinity Purification of Reconstituted Octamer
  • 05:28Nucleosome Reconstitution
  • 07:07Results: Generation of Differentially Isotope-labeled Nucleosomes for Investigating Cross-talk Mechanisms
  • 08:58Conclusion

Summary

Traduction automatique

Ce protocole décrit la reconstitution de nucléosomes contenant différentiellement histones sœurs marqués d'un isotope. Dans le même temps, les nucléosomes asymétriquement modifications post-traductionnelles peuvent être générés après l'utilisation d'une copie préalablement modifiée de l'histone. Ces préparations peuvent être facilement utilisés pour étudier les mécanismes de modification de diaphonie, simultanément sur les deux histones sœurs, en utilisant la spectroscopie de RMN à haute résolution.

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