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Optimierte Einzelzelle TCR Isolation und Generierung von retroviralen Vektoren für In-Vitro und In Vivo Ausdruck menschlichen TCRs
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Journal JoVE Immunologie et infection
Streamlined Single Cell TCR Isolation and Generation of Retroviral Vectors for In Vitro and In Vivo Expression of Human TCRs
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Optimierte Einzelzelle TCR Isolation und Generierung von retroviralen Vektoren für In-Vitro und In Vivo Ausdruck menschlichen TCRs

DOI:
10.3791/55379-v

•

11:21 min

•

September 10, 2017

•

, , , , , , , ,
1Department of Pediatrics, Section of Diabetes and Endocrinology, McNair Medical Institute,Baylor College of Medicine, Texas Children’s Hospital, 2Benaroya Research Institute at Virginia Mason, 3Center for Human Immunobiology,Baylor College of Medicine, Texas Children’s Hospital, 4Department of Pediatrics, Section of Diabetes and Endocrinology,Baylor College of Medicine, Texas Children’s Hospital

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:42Single cell sort and reverse transcription reaction
  • 03:37Multiplex-nested PCR
  • 08:56Subcloning TCR alpha and beta chains
  • 09:56Verification of TCR expression
  • 10:46Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Das aktuelle Protokoll kombiniert, die einzelne Zelle menschlichen TCR Alpha- und Beta-Kette Sequenzierung mit gepaart gestrafft Generation kompatibel mit in Vitro und in Vivo TCR Ausdruck retroviralen Vektoren.

Tags

Single Cell TCR IsolationTCR Alpha And Beta RepertoireTCR CloningMultiplex PCRNested PCRChimeric TCR ConstructSingle-cell PCRReverse TranscriptionT Cell Sorting

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