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Reforçada Amostra Multiplexagem de tecidos utilizando Combinada Precursor isotópica Rotulagem e Isobaric Marcação (cPILOT)
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Enhanced Sample Multiplexing of Tissues Using Combined Precursor Isotopic Labeling and Isobaric Tagging (cPILOT)

Reforçada Amostra Multiplexagem de tecidos utilizando Combinada Precursor isotópica Rotulagem e Isobaric Marcação (cPILOT)

DOI:
10.3791/55406-v

•

09:06 min

•

May 01, 2017

•

, , , ,
1Department of Chemistry,University of Pittsburgh, 2SGS North America Inc., 3Large Molecule Analytical Development, Pharmaceutical Development & Manufacturing Science,Janssen Research and Development

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:14Protein Extraction and Generation of Peptides for Chemical-tagging
  • 02:05Sample Digestion
  • 03:16Dimethylation Labeling (N-termini)
  • 05:13Isobaric Tagging (Lys residues)
  • 06:12Liquid Chromatography – Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) and MS3
  • 07:02Results: cPILOT Can Be Used to Analyze Tissues from an Alzheimer’s Disease Mouse Model and Wild-type Controls
  • 08:23Conclusion

Summary

Traduction automatique

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precursor marcação isotópica combinados e marcação isobaric (cPILOT) é uma estratégia proteômica quantitativa que aumenta a capacidade de multiplexação de amostras de etiquetas isobáricos. Este protocolo descreve a aplicação de cPILOT aos tecidos a partir de controlos modelo de rato da doença e do tipo selvagem de um Alzheimer.

Tags

Enhanced Sample MultiplexingCombined Precursor Isotopic LabelingIsobaric TaggingCPILOTAlzheimer’s DiseaseMouse ModelProtein ChangesAgingNeurodegenerative DiseaseCancerPathogenesisDiagnosisPrognosisTherapeutic TargetsAcetylationProtein NitrationBrainHeartLiverBCA AssayProtein ConcentrationDithiothreitolIodoacetamideL-cysteineTrypsin Digestion

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