Immunoprecipitazione della cromatina
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Vue d'ensemble
Gli istoni sono proteine che aiutano a organizzare il DNA nei nuclei eucariotici fungendo da “impalcature” attorno alle quali il DNA può essere avvolto, formando un complesso chiamato “cromatina”. Queste proteine possono essere modificate attraverso l’aggiunta di gruppi chimici e questi cambiamenti influenzano l’espressione genica. I ricercatori utilizzano una tecnica chiamata immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) per capire meglio quali regioni del DNA si associano a specifiche modificazioni istoniche o ad altre proteine regolatrici geniche. Gli anticorpi vengono utilizzati per isolare la proteina di interesse e il DNA legato viene estratto per l’analisi.
Qui, JoVE presenta i principi alla base di ChIP, discutendo specifiche modificazioni istoniche e la loro relazione con l’espressione genica e l’organizzazione del DNA. Esaminiamo quindi come eseguire un protocollo ChIP ed esploriamo i modi in cui gli scienziati stanno attualmente utilizzando questa tecnica.
