Modifica del genoma
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Vue d'ensemble
Una tecnica consolidata per modificare sequenze specifiche nel genoma è il targeting genico mediante ricombinazione omologa, ma questo metodo può essere laborioso e funziona solo in alcuni organismi. I recenti progressi hanno portato allo sviluppo del “genome editing”, che funziona inducendo rotture a doppio filamento nel DNA utilizzando enzimi nucleasi ingegnerizzati guidati a siti genomici bersaglio da proteine o RNA che riconoscono sequenze specifiche. Quando una cellula tenta di riparare questo danno, le mutazioni possono essere introdotte nella regione del DNA mirata.
In questo video, JoVE spiega i principi alla base dell’editing del genoma, sottolineando come questa tecnica si riferisca ai meccanismi di riparazione del DNA. Quindi, vengono esaminati tre principali metodi di modifica del genoma – nucleasi a dita di zinco, TALEN e il sistema CRISPR-Cas9 – seguiti da un protocollo per l’utilizzo di CRISPR per creare cambiamenti genetici mirati nelle cellule di mammifero. Infine, discutiamo alcune ricerche attuali che applicano l’editing del genoma per alterare il materiale genetico in organismi modello o cellule coltivate.
