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High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination
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FRET di alta precisione a singolo livello molecolare per la determinazione della struttura biomolecola

DOI:
10.3791/55623-v

•

11:24 min

•

May 13, 2017

•

, , , , ,
1Department of Chemistry,Clemson University, 2Department of Physics and Astronomy,Clemson University, 3Department of Biochemistry and Molecular Biology, Center for Membrane Biology, Graduate School for Biomedical Sciences,University of Texas Health Science Center

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:07Preparation of Materials
  • 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
  • 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
  • 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
  • 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
  • 10:54Conclusion

Summary

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Qui viene presentato un protocollo per esperimenti FRET ad alta precisione a livello di singola molecola. Inoltre, questa metodologia può essere usata per identificare tre stati conformazionali nel dominio legante del legame del recettore N-metil-D-aspartato (NMDA). Determinare le distanze precise è il primo passo verso la costruzione di modelli strutturali basati su esperimenti FRET.

Tags

High Precision FRETSingle-moleculeBiomolecule Structure DeterminationFörster Resonance Energy TransferMultiparameter Fluorescence DetectionInterdye Distance MeasurementNMDA ReceptorConformational StatesStructural ModelDynamic Biomolecules

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