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Flash-e-Freeze: uma nova técnica para capturar Membrane Dynamics com Electron Microscopy
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Journal JoVE Biologie
Flash-and-Freeze: A Novel Technique to Capture Membrane Dynamics with Electron Microscopy

Flash-e-Freeze: uma nova técnica para capturar Membrane Dynamics com Electron Microscopy

DOI:
10.3791/55664-v

•

10:01 min

•

May 01, 2017

•

, ,
1Department of Cell Biology,Johns Hopkins School of Medicine, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology,Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health, 3Solomon H. Snyder Department of Neuroscience,Johns Hopkins School of Medicine

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:52Flash-and-Freeze
  • 03:41Automated Freeze-substitution Unit-transfer
  • 06:40Sample Mounting and Imaging
  • 08:24Results: Representative Exocytosis and Endocytosis in Mouse Hippocampal Neurons
  • 08:56Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Nós desenvolvemos uma nova técnica de microscopia electrónica, de "flash-e-congelamento", que permite a visualização da dinâmica da membrana com ms resolução temporal. Esta técnica combina a estimulação optogenetic de neurónios com congelamento de alta pressão. Aqui, demonstramos os procedimentos e descrever os protocolos em detalhe.

Tags

Electron MicroscopyMembrane DynamicsOptogeneticsSynaptic Vesicle RecyclingFlash-and-freezeHigh-pressure FreezingFree SubstitutionTime-resolved Imaging

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