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Nitrógeno cavitación y centrifugación diferencial permite el monitoreo de la distribución periférica de proteínas de membrana en células cultivadas
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Nitrogen Cavitation and Differential Centrifugation Allows for Monitoring the Distribution of Peripheral Membrane Proteins in Cultured Cells
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Nitrógeno cavitación y centrifugación diferencial permite el monitoreo de la distribución periférica de proteínas de membrana en células cultivadas

DOI:
10.3791/56037-v

•

08:24 min

•

August 18, 2017

•

,
1Langone Medical Center,New York University

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:41Cell Harvesting
  • 01:35Nitrogen Cavitation
  • 03:31Separation of Cytosolic and Membrane Fractions
  • 05:22Results: Partitioning of Cellular Proteins in Membrane and Cytosolic Fractions
  • 07:07Conclusion

Summary

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Aquí presentamos los protocolos para la homogeneización de detergente libre de células de mamíferos cultivadas basado en nitrógeno cavitación y posterior separación de las proteínas citosólicas y membrana-limitan por ultracentrifugación. Este método es ideal para el monitoreo de la partición de proteínas periféricas de membrana entre soluble y fracciones de la membrana.

Tags

Nitrogen CavitationDifferential CentrifugationPeripheral Membrane ProteinsCultured CellsSubcellular CompartmentalizationHEK293 CellsHomogenization BufferPressurizationProtease InhibitorCell DisruptionFractionationSoluble FractionMembrane Fraction

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