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Immunologie et infection
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Journal JoVE Immunologie et infection
Targeting Cysteine Thiols for in Vitro Site-specific Glycosylation of Recombinant Proteins
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Targeting Cystein Thiole für in-vitro- standortspezifische Glykosylierung von rekombinanten Proteinen

DOI:
10.3791/56302-v

•

11:25 min

•

October 04, 2017

•

, , , , ,
1Department of Physiology and Pharmacology, Schulich School of Medicine and Dentistry,University of Western Ontario

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
  • 03:44Uniform 15N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
  • 05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
  • 07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
  • 08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
  • 10:11Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Biochemische und strukturelle Analysen des glykosylierten Proteinen erfordern relativ große Mengen an homogenen Proben. Hier präsentieren wir Ihnen eine effiziente chemische Methode für standortspezifische Glykosylierung von rekombinanten Proteinen durch gezielte reaktive Cys Thiole von Bakterien gereinigt.

Tags

Keywords: Cysteine ThiolsSite-specific GlycosylationRecombinant ProteinsStructural BiologyGlycosylation PatternsDisease TherapyPCR MutagenesisDPN1 DigestionProtein Expression

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