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In pool shRNA schermo per riattivazione di MeCP2 sul cromosoma di X inattivo
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Pooled shRNA Screen for Reactivation of MeCP2 on the Inactive X Chromosome
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In pool shRNA schermo per riattivazione di MeCP2 sul cromosoma di X inattivo

DOI:
10.3791/56398-v

•

11:15 min

•

March 02, 2018

•

, , , , , , , ,
1Clinical Research Division,Fred Hutchinson Cancer Research Center, 2Hematology Branch, National Heart, Lung and Blood Institute,National Institutes of Health, 3Epigenetics Program, Department of Cell and Developmental Biology,University of Pennsylvania Perelman School of Medicine, 4Departments of Medicine and Biochemistry,University of Washington

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:17Selecting Single Cell Clones and Characterizing MeCP2 Reporter Expression
  • 04:31Screening the Library for Reactivation Using Hygromycin B Selection
  • 06:44Validating the Identified Hairpins ( Hits )
  • 09:27Results: Isolation of Clones with the Reporter on the Inactive X Chromosome and Characterization of Hygromycin Resistance
  • 10:17Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Segnaliamo un short hairpin RNA (shRNA) e sequenziamento basato su protocollo di ultima generazione per l'identificazione dei regolatori di inattivazione del cromosoma x in una linea cellulare murina con luciferasi firefly e geni di resistenza igromicina fuse con il metil CpG binding protein 2 ( MeCP2) gene sul cromosoma di X inattivo.

Tags

Keywords: Pooled ShRNA ScreenMeCP2Inactive X ChromosomeMouse Tendon FibroblastsLuciferase Assay5-azacytidineWestern BlotCell CultureCell ExpansionClone Selection

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