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Sviluppo di analisi per la quantificazione alto contenuto di formazione aggregata di Sod1 mutante della proteina in cellule viventi
Journal JoVE
Neurosciences
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Journal JoVE Neurosciences
Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells
DOI:

11:12 min

October 04, 2017

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:58Lentivirus Production
  • 02:50Lentiviral Transduction and Stable Line Generation
  • 04:53Dose Response Effect of Proteosome Inhibitors on Protein Aggregation and Image Analysis
  • 07:06Time lapse Imaging of YFP Expression in Living Cells
  • 08:09Results: Quantification of SOD1 Mutant Protein Aggregate Formation
  • 10:04Conclusion

Summary

Traduction automatique

Descriviamo un metodo per quantificare l'aggregazione delle proteine misfolded. I nostri dettagli di protocollo lentivirali indotto generazione linea cellulare stabile, imaging confocale automatizzata e l'analisi di immagine di aggregati proteici. Come un'applicazione illustrativa, abbiamo studiato l'effetto di piccole molecole nel promuovere l'aggregazione di SOD1 nel tempo - e dose-dipendente.

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