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Sola célula cuantificación de las tasas de degradación de proteína por microscopia de fluorescencia Time-lapse en cultivo de células adherentes
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Journal JoVE Biologie du développement
Single-Cell Quantification of Protein Degradation Rates by Time-Lapse Fluorescence Microscopy in Adherent Cell Culture
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Sola célula cuantificación de las tasas de degradación de proteína por microscopia de fluorescencia Time-lapse en cultivo de células adherentes

DOI:
10.3791/56604-v

•

12:06 min

•

February 04, 2018

•

,
1UPSUTER, Institute of Bioengineering (IBI), School of Life Sciences,École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:42Cell seeding and pulse labeling of the SNAP-tag
  • 04:15Time-lapse microscopy
  • 05:23Image processing and analysis
  • 07:55Résultats
  • 10:13Conclusions

Summary

Traduction automatique

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Este protocolo describe un método para determinar proteína vida media en las células adherentes vivas sola, con pulso de etiquetado e imagen Time-lapse de fluorescencia complemento etiqueta de proteínas de fusión.

Tags

Protein DegradationSingle-cellTime-lapse Fluorescence MicroscopyAdherent Cell CultureSNAP-tagProtein Half-lifeFluorescence ImagingProtein TurnoverHeterogeneityEndogenous Protein TaggingOverexpressionDNA Repair EnzymeBenzylguanineFluorescent DyeExponential DecayEmbryonic Stem CellsMonolayerCell-cell InteractionsN-cadherin

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