Name: Floresan, sindirim böceklerde sıvı alımını yeteneklerini belirlemek için manyetik nano tanecikleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Öğrenin, floresan manyetik nano tanecikler kullanarak sıvı beslenen böceklerin beslenme yeteneklerini değerlendirmeyi. Bu yöntem, böcek ağız yapısı ve beslenme mekanizmalarını incelemek için etkilidir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu eser Ulusal Bilim Vakfı (NSF) tarafından desteklenen hayır vermek. IOS 1354956. Dr Andrew D. Warren (Lepidoptera ve biyolojik çeşitlilik, Florida doğa tarihi Müzesi ', University of Florida merkezi McGuire) kelebek resimleri kullanmak için izin için teşekkür ederiz.

1. böcek türleri, çözümleri ve istasyonu kurulumu besleme hazırlanması
Not: Bunlar sıvı alımını yetenekleri ve mouthpart Morfoloji22,23önceki çalışmalarda kullanılmıştır çünkü lahana kelebekler (Pieris rapae L., Pieridae) temsilcisi Lepidoptera tür olarak seçilir. Çünkü onlar sık sık gözenekli yüzeyler13tarihinde besleme gözlenir evi sinekler (sinek domestica L., Muscidae) ve mavi şişe sinekler (Calliphora vomitoria L., Calliphoridae) kullanılır.
<ol>
	<li>Sipariş P. rapae larva bir böcek tedarikçi ve arka YavruIar ve çevre odasında bir yetişkin olarak ortaya kadar üzerlerine yapay ( Tablo malzemelerigörmek) diyet olarak 23 ° C ve 18 L: 6D photoperiod için ayarlayın. Sipariş M. domestica ve C. vomitoria olarak pupa ve onları P. rapaeolarak aynı çevre koşulları, arka. Onlar önce besleme deneyler pupa ortaya sonra Yetişkin kelebekler ve sinekler yem yok.</li>
	<li>Bir % 20 Sükroz çözüm (kontrol) ve sıvı alımı için test etmek için % 20 Sükroz nanopartikül çözüm hazırlamak. Floresan manyetik nano tanecikleri ekleyerek nanopartikül çözüm hazırlamak (demir oksit polyacrylic asit kaplama, yaklaşık 20 nm çapında)24 -% 20 Sükroz çözüm (1 mg/mL dH2O nano tanecikleri ile % 20 sükroz Çözüm 1:1). Fosfat tamponlu tuz (PBS) 1 x çözeltisi hazırlamak (10 x 1 x dH2O, pH 7.4 seyreltilmiş), hangi gruptakiler için kullanılır.</li>
	<li>Bir kelepçe ve ayrı bir beslenme sahne (düz platformu) el ile bir manipülatör oluşan bir beslenme merkezi kurmak (şekil 1). İçbükey bir slayt besleme sahnesinde yerini ve naylon net filtreleri gözenekleri boyutu çapı 1, 5, 8, 11, 20, 30, 41 veya 60 µm ve membran filtreleri gözenek boyutu çapı veya besleme deneyler için yakın 10 µm.</li>
</ol>
2. besleme protokolü
<ol>
	<li>Böceğin organları, bacaklar ve kanatları katlanmış bir kağıt mendil sarın. Sadece baş ve ağız maruz böcek konumlandırın. Böcek böcek besleme sahne (şekil 1) bekletilir hangi birlikte manipülatör üzerinde kelepçe tarafından tutulan iki slayda mikroskop, wings yerleştirin.</li>
	<li>% 20 Sükroz çözüm veya % 20 Sükroz nanopartikül çözüm bir micropipette ile 30 µL damlacık içbükey slayt merkezi için yönetmek. Filtre kağıdı ortasına nanopartikül çözüm damlacık ile hizalanır içbükey slayda belirli gözenek boyutu tek bir filtre kağıt yerleştirin. (Şekil 1) gözenekleri doldurarak filtre kağıdı yayılan çözüm damlacığı ve filtre kağıdı arasındaki temas sonuçlanır. Not: Filtre kağıdı nano tanecikleri nerede yem böcekler filtre kağıdı üzerine olası varlığı en aza indirmek için tam tersi, yerine damlacığı üstüne yerleştirilir.</li>
	<li>Ağız sadece distal bölgelerinde ıslak filtre kağıt besleme Sahne Alanı'nda (şekil 1) iletişim kurabilirsiniz manipülatör ile böcek konumlandırın. Ağız filtre kağıdı üzerine genişletmek ve böcek için 45 beslemek izin vermek için bir böcek PIN kullanmak s.</li>
	<li>Pozisyon ağız filtre kağıdı yüzeyinde mevcut olabilecek sıvı filmlerde besleme böcekler olasılığını en aza indirmek için böylece slayt (i.e. düz parçası dokunmadan filtre kağıdı, bir parçası ile temas doğrudan slayt içbükey parçası yukarıda). Böcek besleme bir ilgi ifade değil Eğer, ağız için filtre kağıdı böcek iğne ile besleme saat süresince tutulamaz.</li>
</ol>
3. diseksiyonlar
<ol>
	<li>Böylece böceğin beden karşılamak için yeterli bir çözüm PBS çözüm bir 50 mm izle cam yer. İzle cam ekipman (makas, böcek pimleri, para cezası nokta forseps anatomi anatomi bahar mikro) stereoscope yanında anatomi bir stereoscope ve pozisyon böcek altında yerleştirin.</li>
	<li>Besleme sonra böcek doku kağıt kaldır ve kanatları kapalı tutun. Baş, bacaklar ve böcek kanatları bahar mikro diseksiyon makası ile kaldırmak ve izle cam (Şekil 2) PBS çözümde böcek yer.</li>
	<li>Gerekirse, böcekler diseksiyonlarının önce anestezi. Forseps karın distal bölge yakınındaki kütikül tarafından böcek tutmak için kullanın. Dominant el ile manikür bir anterior yönde Toraks ulaşılana kadar arka sonunda başlayan karın yan tarafındaki kesmek için makas dissekan bahar mikro kullanın. Sadece manikür kesilir ve kurbanın kanal böcek içinde değil zarar (Şekil 2) sağlamak için özel dikkat.</li>
	<li>Kurbanın kanal (Şekil 2) içinde ortaya çıkarmak için karın açmak için diseksiyon makası ile manikür ek kesim yapmak. Böcek iğneler yardımı ile karın kütikül, yağ vücut ve diğer yapıları kaldırmak ve onları sadece göğüs ve kurbanın kanal izle cam bırakarak sonraki bertarafı için İzle cam dışında yerini değiştirin. Not: Göğüs ve karın dönemde bulunan bir kese benzeri yapı (kurbanın kanalı'nın bir uzantısı) kırpma, diseksiyon ortaya çıkaracaktır.</li>
	<li>Kırpma maruz kalmaz, ürün ortaya kadar Toraks içine ek kesiler makasla olun. Ürün görünür olduğunda, sadece kurbanın kanal izle cam (Şekil 2) kırpma bırakarak böcek kalan bölümlerini Kes gitsin. Not: Lepidoptera kırpma neredeyse şeffaf ve selofan benzeri bu değil sıvı ile dolu ve genişletilmiş Eğer tanımak zor olabilir doğa veya bu diseksiyon sırasında kesilir.</li>
	<li>İyi noktası forseps dissekan sonraki görüntüleme (Şekil 2) bir coverslip (24 x 24 mm) üzerine kırpma eklemenizi sağlar.</li>
</ol>
4. alınan nano tanecikleri tespiti
<ol>
	<li>Ürün üzerinde para cezası nokta diseksiyon forseps kullanarak coverslip bakım ürün parçalanma önlemek pozisyon. CY3 kanal (veya faz kontrast) bir ters confocal mikroskop düşsel vasıl 20 X büyütme için kullanın. Sonra hemen diseksiyon kurumasını önlemek için kırpma görüntü.</li>
	<li>Bar (41,3 mm uzunluğunda ve 8 mm çapında) manyetik bir heyecan mikroskop çalışma aşamasında kontrolünü kaybediyor elinde tut.</li></ol>Böylece her ileri geri hareket yaklaşık bir saniye (Şekil 2) alır ve geriye kırpma (yaklaşık 10 mm mesafe kırpma) yanında manyetik heyecan bar el salla.
	<li>Manyetik heyecan bar el salladı iken, nano tanecikleri için ürün bakarak kontrol edin. Yavaş yavaş çalışma sahne nanopartikül hareketi içinde hemen hemen saydam kırpma için mikroskop oküler lens aracılığıyla bakarken ileri geri hareket. Nano tanecikleri ürün varsa, pozitif besleme, belirten onlar cevap verecektir ve hep bir ağızdan ile manyetik dalga çubuk (Şekil 2) ilave edin.</li>

<ol><li>Vijaysegaran, S., Walter, G. H., Drew, R. A. I. <a target="_blank" href="https://academic.oup.com/aesa/article-abstract/90/2/184/28469/Mouthpart-Structure-Feeding-Mechanisms-and-Natural">Mouthpart structure, feeding mechanisms, and natural food sources of adult Bactrocera (Diptera: Tephritidae).</a> Ann Entomol Soc Am. 90, 184-201 (1997).</li>
<li>Lehnert, M. S., Monaenkova, D., Andrukh, T., Beard, C. E., Adler, P. H., Kornev, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrophobic-hydrophilic+dichotomy+of+the+butterfly+proboscis%5BTitle%5D)+AND+%22J+R+Soc+Interface%22%5BJournal%5D)">Hydrophobic-hydrophilic dichotomy of the butterfly proboscis.</a> J R Soc Interface. 10, 1-10 (2013).</li>
<li>Zhao, J., Wu, J., Yan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erection+mechanism+of+glossal+hairs+during+honeybee+feeding%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+biol%22%5BJournal%5D)">Erection mechanism of glossal hairs during honeybee feeding.</a> J Theor biol. 386, 62-68 (2015).</li>
<li>Redak, R. A., Purcell, A. H., Lopes, J. R. S., Blua, M. J., Mizell, R. F. 3rd, Andersen, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biology+of+xylem+fluid-feeding+insect+vectors+of+Xylella+fastidiosa+and+their+relation+to+disease+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Review+Entomol%22%5BJournal%5D)">The biology of xylem fluid-feeding insect vectors of Xylella fastidiosa and their relation to disease epidemiology.</a> Ann. Review Entomol. 49, 243-270 (2004).</li>
<li>Büttiker, W., Krenn, H. W., Putterill, J. F. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF02526872">The proboscis of eye-frequenting and piercing Lepidoptera (Insecta).</a> Zoomorphology. 116, 77-83 (1996).</li>
<li>Light, J. E., Smith, V. S., Allen, J. M., Durden, L. A., Reed, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolutionary+history+of+mammalian+sucking+lice+%28Phthiraptera%3A+Anoplura%29%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Evol+Biol%22%5BJournal%5D)">Evolutionary history of mammalian sucking lice (Phthiraptera: Anoplura).</a> BMC Evol Biol. 10, (2010).</li>
<li>Krenn, H. W., Aspock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Form%2C+function+and+evolution+of+the+mouthparts+of+blood-feeding+Arthropoda%5BTitle%5D)+AND+%22Arthropod+Struct+Dev%22%5BJournal%5D)">Form, function and evolution of the mouthparts of blood-feeding Arthropoda.</a> Arthropod Struct Dev. 41, 101-118 (2012).</li>
<li>Lehnert, M. P., Pereira, R. M., Koehler, P. G., Walker, W., Lehnert, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Cimex+lectularius+using+heat+combined+with+dichlorvos+resin+strips%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Vet+Entomol%22%5BJournal%5D)">Control of Cimex lectularius using heat combined with dichlorvos resin strips.</a> Med Vet Entomol. 25, 460-464 (2011).</li>
<li>Zaspel, J. M., Kononenko, V. S., Goldstein, P. Z. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10905-007-9090-3">Another blood feeder? Experimental feeding of a fruit-piercing moth species on human blood in the Primorye Territory of far eastern Russia (Lepidoptera: Noctuidae: Calpinae).</a> J Insect Behav. 20, 437-451 (2007).</li>
<li>Barth, F. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBarth%2C+FG+%22Insects+and+flowers%3A+the+biology+of+a+partnership%22">Insects and flowers: the biology of a partnership</a>. , Princeton University Press. Princeton. (1991).</li>
<li>Foil, L. D., Adams, W. V., McManus, J. M., Issel, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bloodmeal+residues+on+mouthparts+of+Tabanus+fuscicostatus+%28Diptera%3A+Tabanidae%29+and+the+potential+for+mechanical+transmission+of+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Entomol%22%5BJournal%5D)">Bloodmeal residues on mouthparts of Tabanus fuscicostatus (Diptera: Tabanidae) and the potential for mechanical transmission of pathogens.</a> J Med Entomol. 24, 613-616 (1987).</li>
<li>Monaenkova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butterfly+proboscis%3A+combining+a+drinking+straw+with+a+nanosponge+facilitated+diversification+of+feeding+habits%5BTitle%5D)+AND+%22J+R+Soc+Interface%22%5BJournal%5D)">Butterfly proboscis: combining a drinking straw with a nanosponge facilitated diversification of feeding habits.</a> J R Soc Interface. 9, 720-726 (2012).</li>
<li>Lehnert, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouthpart+conduit+sizes+of+fluid-feeding+insects+determine+the+ability+to+feed+from+pores%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">Mouthpart conduit sizes of fluid-feeding insects determine the ability to feed from pores.</a> Proc. R. Soc. B. 284, (2017).</li>
<li>Grimaldi, D., Engel, M. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGrimaldi%2C+D+%22Evolution+of+the+insects%22">Evolution of the insects</a>. , Cambridge University Press. New York, NY. (2005).</li>
<li>Adler, P. H., Foottit, R. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAdler%2C+PH+%22Insect+biodiversity%3A+science+and+society%22">Insect biodiversity: science and society</a>. , Wiley Blackwell. Chichester, UK. (2009).</li>
<li>Tsai, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoporous+artificial+proboscis+for+probing+minute+amount+of+liquids%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Nanoporous artificial proboscis for probing minute amount of liquids.</a> Nanoscale. 3, (2011).</li>
<li>Krenn, H. W. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s004350050053">Proboscis sensilla in Vanessa cardui (Nympahlidae, Lepidoptera): Functional morphology and significance of flower-probing.</a> Zoomorphology. 118, 23-30 (1998).</li>
<li>Plateau, J. A. F. Experimental and theoretical researches on the figures of equilibrium of liquid mass withdrawn from the action of gravity. (Transl). <a target="_blank" href="http://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/14786445708642346">Annual Report of the Board Regents Smithsonian Institution</a>. , Government Printing Office. Washington, DC. 207-285 (1863).</li>
<li>Socha, J. J., Westneat, M. W., Harrison, J. F., Waters, J. S., Lee, W. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+phase-contrast+x-ray+imaging%3A+a+new+technique+for+the+study+of+animal+form+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biol%22%5BJournal%5D)">Real-time phase-contrast x-ray imaging: a new technique for the study of animal form and function.</a> BMC Biol. 5, 6(2007).</li>
<li>Westneat, M. W., Socha, J. J., Lee, W. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+biological+structure%2C+function+and+physiology+using+synchrotron+x-ray+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Advances in biological structure, function and physiology using synchrotron x-ray imaging.</a> Annu Rev Physiol. 70, 119-142 (2008).</li>
<li>Lee, W. -K., Socha, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+visualization+of+hemolymph+flow+in+the+heart+of+a+grasshopper+%28Schistocerca+americana%29%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Physiology%22%5BJournal%5D)">Direct visualization of hemolymph flow in the heart of a grasshopper (Schistocerca americana).</a> BMC Physiology. 9, 2(2009).</li>
<li>Lehnert, M. S., Mulvane, C. P., Brother, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouthpart+separation+does+not+impede+butterfly+feeding%5BTitle%5D)+AND+%22Arthropod+Struct+Dev%22%5BJournal%5D)">Mouthpart separation does not impede butterfly feeding.</a> Arthropod Struct Dev. 43, 97-102 (2014).</li>
<li>Lehnert, M. S., Beard, C. E., Gerard, P. D., Kornev, K. G., Adler, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+the+lepidopteran+proboscis+in+relation+to+feeding+guild%5BTitle%5D)+AND+%22J+Morphol%22%5BJournal%5D)">Structure of the lepidopteran proboscis in relation to feeding guild.</a> J Morphol. 277, 167-182 (2016).</li>
<li>Yan, H., Sung, B., Kim, M. -H., Kim, C. <a target="_blank" href="http://iopscience.iop.org/article/10.1088/2053-1591/1/4/045032">A novel strategy for functionalizable photoluminescent magnetic nanoparticles.</a> Mater. Res. Express. 1, 045032(2014).</li>
<li>Kingsolver, J. G., Daniel, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+mechanics+and+energetics+of+nectar+feeding+in+butterflies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+Biol%22%5BJournal%5D)">On the mechanics and energetics of nectar feeding in butterflies.</a> J Theor Biol. 76, 167-179 (1979).</li>
<li>Krenn, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+mechanisms+of+adult+Lepidoptera%3A+Structure%2C+function%2C+and+evolution+of+the+mouthparts%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rev+Entomol%22%5BJournal%5D)">Feeding mechanisms of adult Lepidoptera: Structure, function, and evolution of the mouthparts.</a> Ann Rev Entomol. 55, 307-327 (2010).</li>
<li>Tsai, C. -C., Monaenkova, D., Beard, C. E., Adler, P. H., Kornev, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paradox+of+the+drinking-straw+model+of+the+butterfly+proboscis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Paradox of the drinking-straw model of the butterfly proboscis.</a> J Exp Biol. 217, 2130-2138 (2014).</li>
<li>Bauder, J. A. S., Handschuh, S., Metscher, B. D., Krenn, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+morphology+of+the+feeding+apparatus+and+evolution+of+proboscis+length+in+metalmark+butterflies+%28Lepidoptera%3A+Riodinidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+J+Linn+Soc%22%5BJournal%5D)">Functional morphology of the feeding apparatus and evolution of proboscis length in metalmark butterflies (Lepidoptera: Riodinidae).</a> Biol J Linn Soc. 110, 291-304 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Böcek mouthpart işlevselliği tarihsel olarak brüt Morfoloji çalışmalardan anlaşılmaktadır (örn., Lepidoptera hortum işlevi ilgili bir içme saman25,-26); Ancak, deneysel kanıt dahil son yıllarda yapılan çalışmalarda bir paradigma kayması böcek ağız ve yapı-fonksiyon ilişkileri2,12,13 karmaşıklığı anlayışımız içinde sonuçlandı , 22</su...

Birçok böcek ağız (proboscises) gruplarınız sıvılar üzerinde beslenmesi için uyarlanmış, meyve, çürüyen nektar gibi su akar (örneğin Diptera1, Lepidoptera2, Hymenoptera3), xylem (Hemiptera4), gözyaşları (Lepidoptera 5) ve kan (Phthiraptera6, sinek7, yani7, Hemiptera8, Lepidoptera9). Böcekler üzerinde sıvı besleme yeteneği ekosistem Sağlığı (örneğin tozlaşma10), hastalık iletim4,11, biodiversification2,12ve çalışmalar için uygundur yakınsak evrim13. Çeşitli gıda kaynaklarına rağmen bazı sıvı besleme böcekler arasında bir tema mikro veya nano boyutlu damlacıkları, sıvı Filmler veya gözenekli yüzeyler için sınırlı sıvı az miktarda elde etmek için yeteneğidir.
Böcekler (% 20 tüm hayvan türlerinin14,15) sıvı beslenme ve gıda kaynakları çeşitli üzerinde beslemek için yeteneklerini geniş çeşitliliği göz önüne alındığında, onların beslenme anlama davranışları ve sıvı alımını mekanizmaları çok alanda önemli. Böcek mouthpart işlevi, örneğin, biomimetic teknoloji, örneğin, küçük miktarlarda sıvı istihdam benzer yöntemlerle kazanılması gibi görevleri gerçekleştirebilirsiniz mikrosıvısal cihazlar gelişiminde bir rol oynamıştır böcekler tarafından16. Sıvı alımını mekanizmaları, ancak, çalışmalarda temel bir sorun sadece nasıl böcekler üzerinde sıvı besleme belirleme ama mekanizmasını destekler deneysel kanıt alınıyor. Sadece davranış kullanarak (örneğin, hortum12,17ile sondalama) beslenme için bir gösterge çünkü başarılı sıvı alımını onaylamak değil, ne de rota belirlemek için bir yol sağlamaz yetersiz olduğu gibi bu Onlar böcek geçerken sıvıları seyahat. Buna ek olarak, deneyler ile az miktarda sıvı daha iyi performans sıvı bir sınırlayıcı kaynak2,12nerede doğal beslenme senaryoları temsil eder.
Faz kontrast görüntüleme Monarch kelebek (Danaus plexippus L.) ile nasıl kelebekler gözenekli yüzeyler12den küçük miktarlarda sıvı besleme değerlendirmek için kullanılan x-ışını. Monarch kelebek için küçük gözenekleri yemek kanalı içine sınırlı sıvıları getirmek için hortum cuticular projeksiyonlar (dorsal legulae) arasında boşluk üzerinden kılcal eylemini kullanın. Gelen sıvı büyür ve sonra kelebeğin gut için eylem başından emme pompası tarafından taşınır Yaylası istikrarsızlık12,18tarafından sıvı bir köprü çöker gıda kanal duvarda bir film oluşturur. X-ışını faz kontrast görüntüleme böcekler12,19,20,21içinde sıvı akış görüntülenmesi için en uygun bir araç olsa da, teknik hazır değil ve daha kolay yöntemi hızlı alımı sıvıları yeteneği bir böceğin değerlendirilmesi için gerekli değildir ve onları yemek.
D. plexippus için besleme mekanizması diğer Lepidoptera ve sinekler (Diptera) (her iki grup sıvılar üzerinde gözenekli yüzeyler arasında besleme) için geçerli olup olmadığını belirlemek için anıldı vd. 13 burada ayrıntılı rapor gözenekli yüzeyler arasında küçük miktarlarda sıvı beslemeye bir böceğin yeteneği değerlendirmek için bir teknik uygulanır. Burada özetlenen protokolü kullanan çalışmalar ıslak ve gözenekli yüzeyler için olsa da, bu havuzu besleme mekanizmaları adresleme gibi diğer çalışmalar için yöntemler değiştirilebilir. Buna ek olarak, uygulamaları havacilik ve bioinspired teknolojisi de dahil olmak üzere diğer alanlarına genişletmek.

<table><tbody><tr><td>%20 sükroz çözeltisi</td><td>Domino Şekeri</td><td></td><td>dH2O</td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin (PBS)</td> ile sükroz çözeltisini üretmek için gereken şeker, <td>Sigma-Aldrich</td><td>P5493</td><td>Böcek diseksiyonları için dH2O'da 1X'e seyreltilmiş 10X konsantrasyonu</td></tr> Tek <tr><td>çöküntü içbükey slayt</td><td>AmScope</td><td>BS-C6</td><td>Slayt, besleme aşaması kurulumu</td></tr> <tr>için gereklidir<td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore</td><td>NY6004700 (60 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreler</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore</td><td>NY4104700 (41 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreleri</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore NY3004700</td><td>(30 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreler</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore NY2004700</td><td>(20 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreler</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Kırlangıç NY1104700</td><td>(11 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gereken naylon ağ filtreleri ve gözenek filtreleri</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore TCTP04700</td><td>(10 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreler</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore TETP04700</td><td>(8 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreler</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore</td><td>TMTP04700 (5 & mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreler</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>EMD Millipore RTTP04700</td><td>(1 &mikro; m)</td> <td>Böcek besleme için gözenekli bir yüzey oluşturmak için gerekli naylon ağ filtreleri ve izopor filtreleri</td></tr><tr><td>İris mikrodiseksiyon makası</td><td>Carolina Biyolojik Tedarik Şirketi</td><td>623555</td><td>Diseksiyonlar için kullanılan makaslar</td></tr><tr><td>Böcek pimleri</td> <td>3Bioquip Ürünleri</td><td>1208B1</td><td>Diseksiyonlar ve besleme denemeleri sırasında kullanılan pimler</td></tr><tr><td>Ekstra ince nokta diseksiyon forsepsleri</td><td>Carolina Biyolojik Tedarik Şirketi</td><td>624684</td><td>Diseksiyon ekipmanı</td></tr><tr><td>Leica M205 C Stereoskop</td><td>Leica Microsystems</td><td>M205 C</td><td>Diseksiyonlar için kullanılan stereoskop</td></tr><tr><td>Ters konfokal mikroskop</td><td>Olympus</td><td>IX81</td><td>Manyetik nanopartikülleri tespit etmek için kullanılan floresan mikroskop</td></tr><tr><td>Fisherbrand PTFE Tek Kullanımlık Karıştırma Çubuğu</td><td>Fisherscientific</td><td>S68067</td><td>Nanopartikülleri tespit etmek için kullanılan mıknatıs</td></tr><tr><td>Kimtech Science Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark Professional</td><td>34155</td><td>Besleme denemeleri sırasında böcekleri güvence altına almak için kullanılan dokular</td></tr><tr><td>Ev sineği (Musca domestica) pupaları</td><td>Mantisplace.com</td><td></td><td>deneyler için böcekler</td></tr><tr><td>Mavi şişe sineği (Calliphora vomitoria) deneyler için pupa</td><td>Mantisplace.com</td><td></td><td>böcekler</td></tr><tr><td>Lahana kelebeği (Pieris rapae) larvaları</td><td>Carolina Biyolojik Tedarik Şirketi</td><td>144102</td><td>deneyler için böcekler</td></tr><tr><td>Finnpipette F1&nbsp;</td><td>Sıvıları dağıtmak için ThermoFisher Scientific</td><td>4641080N</td><td>mikropipet</td></tr><tr><td>uçları Finntip 250 pipet uçları</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>9400250</td><td>mikropipet uçları</td></tr><tr><td>Mikroskop Cam kapak slaytları (=lameller) (24 x 24 mm)</td><td>AmScope</td><td>CS-S24-100</td><td>böceğin mahsulünü konfokal mikroskopta görüntülemek için lameller</td></tr></tbody></table>

floresan, sindirim böceklerde sıvı alımını yeteneklerini belirlemek için manyetik nano tanecikleri

The Ingestion of Fluorescent, Magnetic Nanoparticles for Determining Fluid-uptake Abilities in Insects

Sıvı besleme böcekler havuzları, Filmler, ortamda mevcut olan veya küçük gözenekleri için sınırlı sıvılar, çeşitli yemek. Sıvı Alım çalışmaları mouthpart yapısı ve fonksiyonu ilişkileri değerlendirme gerektirir; Ancak, sıvı alımını mekanizmaları tarihsel olarak yapısal mimarisi, deneysel kanıtlar ile bazen refakatsiz gözlemleri değişkenden. Burada, kelebekler (Lepidoptera) ve az miktarda sıvı kullanarak sinekler (Diptera) ile sıvı alımını yeteneklerini değerlendirmek için bir roman yöntemi raporu. Böcekler belirli gözenek boyutları filtre kağıtları üzerinden Floresan, manyetik nano tanecikleri ile karışık bir % 20 Sükroz çözüm ile beslenir. Kırpma (sıvılar depolamak için kullanılan iç yapısı) böcek kaldırılır ve üzerinde confocal mikroskop yer. Bir mıknatıs böcekler sıvıları yemek mümkün olup olmadığını gösteren nano tanecikleri, varlığını belirlemek için ürün tarafından el salladı. Bu yöntem, Lepidoptera ve solucanlar arasında gözenekli yüzeyler arasında beslenirken paylaşılan potansiyel bir yaygın besleme mekanizması (kılcal eylem ve sıvı köprü oluşumu) ortaya çıkarmak için kullanılır. Buna ek olarak, bu yöntem mekanizmaları arasında sıvı besleme böcekler önemli hastalık iletim ve Biyomimetik ve nano veya mikro ölçekli kanalları dahil olabilecek diğer çalışmalarda da dahil olmak üzere çeşitli beslenme çalışmaları için kullanılabilir nerede sıvı taşıma doğrulama gerektirir.

Desen sıvı alımını yeteneklerine sıvı besleme böcekler arasında çalışma oluştuğunda besleme belirlenmesi gerekir. Burada özetlenen protokolü13Lepidoptera ve solucanlar arasında sınırlayıcı gözenek boyutu varsayımını sınamak için kullanılır. Sınırlayıcı gözenek boyutu hipotez gözenek boyutu çapı besleme kanallarını12çapı daha küçükse, sıvı besleme böcekler sıvı dolu gözenekleri yem olamaz devletler. Gözenekli yüzeyinden gelen sıvı gözenekleri...

Sıvı besleme böcekler dakika miktarlarda sıvı gözenekli yüzeyler elde etmek için yeteneği var. Bu iletişim kuralı doğrudan sıvılar gözenekli yüzeyler Floresan, manyetik nano tanecikleri ile besleme çözümleri kullanarak yemek böcek için yetenek belirlemek için bir yöntem açıklanır.

Floresan, sindirim böceklerde sıvı alımını yeteneklerini belirlemek için manyetik nano tanecikleri

Fluid-feeding insects ingest a variety of liquids, which are present in the environment as pools, films, or confined to small pores. Studies of liquid ...

Bu prosedürün genel amacı, floresan manyetik nanopartiküller ile karıştırılmış bir sakaroz çözeltisi kullanarak sıvı ile beslenen böceklerde beslenmenin fizyolojik parametrelerini değerlendirmektir. Bu yöntem, böcek ağız parçalarının yapısı, işlevi, ilişkileri ve böcek besleme mekanizmaları gibi entomoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, böceklerin havuz veya sıvı film olarak bulunan sıvıları alıp alamayacaklarını belirlememize izin vermesidir.Bu gösteride mavi şişe sinekleri kullanılmaktadır çünkü sıvı alım yetenekleri ve ağız kısmı morfolojisi iyi belgelenmiştir. Karasinekler, lahana kelebekleri ve diğer sıvı beslenen böcekler kullanılabilir. Sinek pupası elde edin ve bunları günde 18 saat ışık alan ve 23 santigrat derecede bir çevre odasına yerleştirin.Yetişkinler pupalarından çıktıktan sonra, deneyden önce onları beslemeyin. Deneysel gıda için, mililitre başına 0.5 miligram nanopartikül ile yüzde 20 sükroz çözeltisi hazırlayın. Ardından, bir manipülatör, bir kelepçe ve bir besleme aşamasından oluşan bir besleme istasyonu hazırlayın.Besleme aşamasında, yiyeceği içbükey bir slaytla tutun. Ayrıca, içbükey sürgünü kaplamak iç

the-ingestion-fluorescent-magnetic-nanoparticles-for-determining

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Laboratuarda üretilen Floresan nanopartiküller fizyolojik homeostazı sırasında sinyalizasyon ve interstisyel sıvı sırasında hücre gibi biyolojik sistemler görüntüleme iyon konsantrasyonları ve iyon akıları için kullanılır.

Biyolojik Sistemleri İyon Konsantrasyon Ölçümü için Floresan Nanopartiküller

Bu yazıda, RAW 264.7 hücreleri tarafından polianhidrid nanopartiküller veya bakteri içselleştirilmesi ölçmek için multi-spektral görüntüleme sitometrisi kullanan bir metodu tanımlar.

Çoklu-spektral Görüntüleme Akım Sitometri tarafından Nanopartiküller ve Bakterilerin Hücresel İçselleştirilmesi Analizi

Bu videoda, nanosensörler kullanarak gıda ve su numunelerindeki bakteriyel kirleticileri tespit etmek için kullanılan bir teknik gösterilmektedir. Hedef patojenik bakteriler, manyetik gevşeme ve floresan emisyon modalitelerinin bir kombinasyonu ile tespit edilir.

Manyeto-floresan nanosensörler kullanarak bakteriyel kontaminasyonu tespit etme

Bu video, manyetik nanoparçacık tabanlı bir immünolojik test için bir mikroakışkan sistemi göstermektedir. Algılama sistemi, kanalları içinde manyetik bir tuzak içeren bir mikroakışkan cihaz kullanır. Primer ve peroksidaz konjuge sekonder antikorlara bağlı antijen kaplı manyetik nanopartiküllerden oluşan önceden oluşturulmuş immünokompleksler kanallara sokulur. İmmünokompleksler, harici bir manyetik alan uygulandıktan sonra gözenekli manyetik tuzakta yakalanır. Peroksidazlar tarafından kataliz...

Mikroakışkan Bir Cihaz Kullanan Manyetik Nanopartikül Bazlı Bir İmmünoassay

MRI kullanarak hücrelerin Takip geçmiş yıllarda kayda değer bir ilgi kazanmıştır. Bu protokol, flor ile dendritik hücrelerin etiketlenmesi açıklanmaktadır...

Kullanarak İzleme Dendritik Hücre Göç<sup&gt; 19</sup&gt; F /<sup&gt; 1</sup&gt; H Manyetik Rezonans Görüntüleme

Akış sitometresi ile bağışık hücrelerin tanımlanmış alt grupları ile nanopartikül etkileşim analizi.

Sitometrisi ile Primer İmmün hücre alt Floresan Nanoparçacık Etkileşimleri Algılama

in vivo görüntüleme için floroforların kullanımı, opsonizasyon, hızlı klirens, düşük saptama hassasiyeti ve konakçı üzerindeki sitotoksik etkiler nedeniyle büyük ölçüde sınırlanabilir. Floroforların lipozomlardaki film hidrasyonu ve ekstrüzyon ile kapsüllenmesi, floresan söndürme ve korumaya yol açar, bu da yüksek algılama hassasiyeti ile in vivo görüntülemeyi mümkün kılar.

Aracı Olarak bir lipozomal-kapsüllü Yakın-Kızılötesi floroforun Floresan-söndürme İn Vivo Optik Görüntüleme

Bu el yazması, floresan işaretli nanopartiküllerin doğrudan canlı hücrelerde endositozundan sonra hücre içi gen ekspresyonunun saptanmasına izin veren yeni bir tekniği tanımlamaktadır. Yöntem, hücrelerin manipülasyonunu gerektirmez ve hedef gen veya türe göre sınırlı değildir.

Floresan etiketli Nanopartiküller kullanma Fare, İnsan ve domuz Menşe Canlı hücreler hücre içi Gen İfade Algılama

Hızlı algılama özellikle patojenik bakterilerin manyetik gevşeme ve floresan emisyon modaliteleri kombinasyonu ile hedef ve bu protokol genel amacı, düşük maliyetli, taşınabilir için fonksiyonel nanosensors sentez etmektir.

Gıda kaynaklı patojen tarama kullanarak Manyeto-floresan Nanosensor: E. Coli O157: H7 hızlı tespiti

Hedef özgü probları protein ifade çeşitli hastalık (Örneğin, iltihap, enfeksiyon ve tumorigenesis) gibi moleküler mekanizmaları analiz etmek için yenilikçi bir araç temsil eder. Bu çalışmada, bağırsak makrofaj infiltrasyonu F4/80 özel tomografi Floresans aracılı kullanarak kolit, fare modeli üç boyutlu bir nicel tomografik değerlendirilmesi açıklar.

Floresan-aracılı tomografi algılama ve fare bağırsak iltihabı makrofaj ile ilgili miktar

Demir oksit nanopartiküller, zararsız bir sol jel prosedürü ile sentezlenir ve anionik kısa moleküller veya polimer ile kaplanır. İnsan kök hücrelerinin içindeki manyetik nanopartiküllerin birleştirilmesi ve biyotransformasyonlarını izlemek için manyetometri kullanımı titreşimli bir örnek manyetometre (VSM) kullanılarak gösterilmiştir.

Hücresel Kuruluş ve Daha Sonra Kimyasal Synthetized Demir Oksit Nanopartiküllerinin Biyobozunurluğunu İzlemek için ManyetometriNin Kullanılması

Öğrenin, floresan manyetik nano tanecikler kullanarak sıvı beslenen böceklerin beslenme yeteneklerini değerlendirmeyi. Bu yöntem, böcek ağız yapısı ve beslenme mekanizmalarını incelemek için etkilidir.

Floresan, sindirim böceklerde sıvı alımını yeteneklerini belirlemek için manyetik nano tanecikleri

Daha fazla video keşfet