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Ingénierie « Golden » Fluorescence par l’Incorporation de la pression sélective d’amino-acides Non canoniques et analyse des protéines par spectrométrie de masse et de Fluorescence
Journal JoVE
Bio-ingénierie
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Journal JoVE Bio-ingénierie
Engineering ‘Golden’ Fluorescence by Selective Pressure Incorporation of Non-canonical Amino Acids and Protein Analysis by Mass Spectrometry and Fluorescence
DOI:

11:51 min

April 27, 2018

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:46Recombinant Protein Expression
  • 04:05Target Protein Purification via Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography
  • 05:20Intact Protein Mass Analysis by High-performance Liquid Chromatography Coupled to Electrospray Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry
  • 06:38Fluorescence Lifetime Measurements and Decay-associated Spectra of GdFP
  • 07:59Results: Gold Fluorescent Protein Analysis by Mass Spectrometry and Fluorescence
  • 10:13Conclusion

Summary

Traduction automatique

Biologie synthétique permet l’ingénierie des protéines avec des propriétés sans précédent à l’aide de l’insertion précurseur des aminoacides non canonique. Ici, nous avons présenté comment une variante spectralement décalée vers le rouge d’un fluorophore GFP-type avec des propriétés spectroscopiques de fluorescence roman, appelée protéine fluorescente « or » (GdFP), est produite par e. coli par incorporation de pression sélective (SPI).

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