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Isolamento do peritônio-derivado de mastócitos e sua caracterização funcional com Ca2 +-imagens e ensaios de degranulação
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Journal JoVE Immunologie et infection
Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays

Isolamento do peritônio-derivado de mastócitos e sua caracterização funcional com Ca2 +-imagens e ensaios de degranulação

DOI:
10.3791/57222-v

•

11:31 min

•

July 04, 2018

•

, , ,
1Institute of Pharmacology,Ruprecht-Karls Heidelberg University

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:38PMC Isolation and Cultivation by Intraperitoneal Lavage
  • 03:14Fluorometric Intracellular Free Calcium Concentration Measurement in PMCs
  • 06:38Beta-hexosaminidase Release Measurement in PMCs
  • 08:46Results: Beta-hexosaminidase Release Colorimetric Multi-well Measurements Performed with PMCs Isolated from Wild Type Mice
  • 10:14Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para isolar e cultivar os mastócitos peritoneais murino. Também descrevemos dois protocolos para a sua caracterização funcional: uma imagem fluorescente de enciclopédia Ca2 + concentração intracelular e um ensaio de degranulação baseado na quantificação colorimétrica de β-hexosaminidase a liberado.

Tags

Keywords: PeritoneumMast CellsCalcium ImagingDegranulationIntracellular SignalingExcitable CellsIon ChannelsImmune Cell ActivationMediator ReleaseFura-2RPMI MediumPeritoneal CavityCell SuspensionIL-3SCFIgE Receptors

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