Journal
/
Génétique
/
En enkel, hurtig og kvantitative analysen til foranstaltning reparation af DNA-protein krydsbindinger på plasmider transfekteret i pattedyrceller
Journal JoVE
Génétique
This content is Free Access.
Journal JoVE Génétique
A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

En enkel, hurtig og kvantitative analysen til foranstaltning reparation af DNA-protein krydsbindinger på plasmider transfekteret i pattedyrceller

DOI:
10.3791/57413-v

•

11:58 min

•

March 05, 2018

•

,
1Department of Pharmacology,University of Minnesota

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:18Generation of DNA-protein Crosslink Containing Plasmid
  • 06:21Transfection into Mammalian Cells
  • 08:39SSPE-qPCR
  • 10:02Results: Use of Strand-specific Primer Extension Based q-PCR to Quantify the DNA-protein Crosslinks
  • 11:08Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Målet med denne protokol er at kvantificere reparation af definerede DNA-protein krydsbindinger på plasmid DNA. Lesioned plasmider er transfekteret ind i modtagerens pattedyr cellelinjer og lav-Molekylær vægt høstet på flere gang point efter Transfektion. DNA reparation kinetik er kvantificeret benytter strand-specifikke primer forlængelse efterfulgt af qPCR.

Tags

DNA-protein CrosslinksPlasmid DNAMammalian CellsDNA RepairTrans-Pacific Primer Extension QPCR AssayAdductsPolymerase BlockingHouse Cell Reactivation8-oxoguanineT4 Polynucleotide KinasePrimer ExtensionPhenol-chloroform Extraction

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/57413?article_type=v

Værktøjer til at undersøge, hvilken rolle for Arkitektonisk Protein HMGB1 i behandling af Helix fordrejende, site-specifikke DNA interstrengstværbindinger
check_url/fr/57413?article_type=v

En standardmetode til at undersøge ejendommen mutagenicitet som en funktion af punkt Mutation reparation katalyseret af CRISPR/Cas9 og SsODN i humane celler
check_url/fr/57413?article_type=v

Laser Microirradiation at studere In Vivo cellulære svar til Simple og komplekse DNA-skader
check_url/fr/57413?article_type=v

Tilpasning af hybridisering fange af kromatin-associerede proteiner for Proteomics til pattedyrceller
check_url/fr/57413?article_type=v

Formaldehyd-assisteret Isolation af regulerende elementer til foranstaltning kromatin tilgængelighed i pattedyrceller
check_url/fr/57413?article_type=v

Test af flerkopiværktøj plasmider rolle i udviklingen af antibiotikaresistens
check_url/fr/57413?article_type=v

Den replika sæt metode: En høj overførselshastighed tilgang til kvantitativt foranstaltning Caenorhabditis elegans levetid
check_url/fr/57413?article_type=v

Gensplejsning af Dictyostelium discoideum celler baseret på udvælgelse og vækst på bakterier
check_url/fr/57413?article_type=v

Kromatin Immunoprecipitation assay ved hjælp af Mikrococcal-nukleaser i pattedyrsceller
check_url/fr/57413?article_type=v

Massespektrometri-baseret Proteomics analyser ved hjælp af OpenProt Database til at afsløre nye proteiner oversat fra ikke-kanoniske åbne læserammer

Read Article