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Un rapide et Facile de Pipeline pour générer des Mutants de Point génomique dans c. elegans en utilisant CRISPR/Cas9 ribonucléoprotéines
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A Rapid and Facile Pipeline for Generating Genomic Point Mutants in C. elegans Using CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins
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Un rapide et Facile de Pipeline pour générer des Mutants de Point génomique dans c. elegans en utilisant CRISPR/Cas9 ribonucléoprotéines

DOI:
10.3791/57518-v

•

08:37 min

•

April 30, 2018

•

, , , ,
1Department of Pharmacology,University of Michigan

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:42sgRNA Target Selection and Homology-directed Repair Template Design
  • 02:21Prepare Injection Mix and Injection Protocol
  • 03:18Screen P0 Plates and Single mCherry(+) F1s
  • 04:03Single Worm PCR and Genotyping
  • 05:41Indentification and Sequence Verification of Edited Animals
  • 06:34Results: Rapid CRISPR/Cas9 Generated Point Mutations in C. elegans sod-1
  • 07:50Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Nous présentons ici une méthode pour l’ingénieur le génome de c. elegans en utilisant CRISPR-Cas9 ribonucléoprotéines et modèles de réparation dépendant d’homologie.

Tags

CRISPR/Cas9Genomic Point MutationC. ElegansHomology Directed RepairSsODNSgRNARestriction Endonuclease SiteNeurosciencesNeurodegenerative DiseaseEndogenous Regulatory ControlProtein OverexpressionPipelineRapidFacile

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