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2 em 1: uma etapa de purificação da afinidade para a análise paralela de proteína-proteína e proteína-metabólito complexos
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2 in 1: One-step Affinity Purification for the Parallel Analysis of Protein-Protein and Protein-Metabolite Complexes

2 em 1: uma etapa de purificação da afinidade para a análise paralela de proteína-proteína e proteína-metabólito complexos

DOI:
10.3791/57720-v

•

08:23 min

•

August 06, 2018

•

, ,
1Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:47Preparation of Plant Cell Material
  • 01:55Tandem Affinity Purification (TAP)
  • 04:59Metabolite and Protein Extraction
  • 06:15Results: Simultaneous Characterization of Protein-Protein and Protein-Metabolite Interactions Employing a Single-Step Tandem Affinity Purification Coupled with Mass Spectrometry
  • 07:23Conclusion

Summary

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Interações da proteína-proteína e proteína-metabólito são cruciais para todas as funções celulares. Aqui, descrevemos um protocolo que permite a análise paralela dessas interações com uma proteína de escolha. Nosso protocolo foi otimizado para culturas de células de plantas e combina a purificação da afinidade com espectrometria de massa base de proteína e deteção do metabólito.

Tags

Keywords: Affinity PurificationProtein-protein ComplexesProtein-metabolite ComplexesParallel AnalysisBasic ResearchMedicalPharmaceuticalBiotechnologicalSmall Molecular LigandsIn Vivo ConditionsInteracting MoleculesPSBL Arabidopsis ThalianaCell CultureMSMO MediumLogarithmic Growth PhaseMixer MillLysis BufferIgG Sepharose Beads

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