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Modelagem de microcircuito sináptica com Cocultures 3D de astrócitos e neurônios de células-tronco pluripotentes humanas
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Chapitres
- 00:04Titre
- 00:49Generation and Maintenance of Astrocyte Progenitors (hAstros) from hPSCs
- 02:41Generation and Maintenance of Neurons (hNeurons) and Inducible Neurons (iNeurons) from hPSCs
- 03:27Preparation and Maintenance of 3D Sphere Co-cultures
- 05:42Measurement of Live Synaptic Physiology with Multielectrode Arrays (MEAs)
- 06:56Results: Morphological and Physiological Characteristics of Synaptic Microcircuits
- 08:07Conclusion
Neste protocolo, nosso objetivo é descrever um método reprodutível para os neurônios de células-tronco derivadas de pluripotentes humanas combinando dissociado e astrócitos juntos em 3D sphere cocultures, mantendo estas esferas em condições de flutuação livre e, posteriormente medindo a atividade sináptica circuito das esferas com immunoanalysis e gravações de matriz multielectrode.
Tags
Keywords: Synaptic Microcircuit3D CoculturesAstrocytesNeuronsHuman Pluripotent Stem CellsNeural Cell TypesSynaptic Circuit FormationNeurosciencesOrganoid TechnologiesDrug DevelopmentNeuroregenerationNeural ProgenitorsAstrocyte ProgenitorsAstrocyte SubtypesNeural InductionNeural MediumRho-kinase InhibitorECM-coated PlatesCell AggregationCell DissociationCell Identity ConfirmationCryo-preservation
