تنبيب الشفوي من الزرد الكبار: نموذج لتقييم امتصاص الأمعاء للمركبات النشطة بيولوجيا

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الغشاء المخاطي ، مثل كيفية امتصاص الغشاء المخاطي للأمعاء للمركبات البيولوجية وكيف تعدل هذه البيولوجية الجهاز المناعي في الموقع المحلي بعد النوبات. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه من السهل إعداد ، سريع ، ويظهر معدلات وفيات منخفضة. يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة في vaccinology المخاطية.

ويمكن أيضا أن تطبق على مركبات أخرى، مثل المواد الكيميائية، والمواد السامة، أو مسببات الأمراض. المرئية مظاهرة من هذه الطريقة أمر بالغ الأهمية كما هو الحال في النوبات عن طريق الفم وتشريح الأمعاء، تحتاج إلى توخي الحذر لأنه في النوبه يمكن أن تجرح حمار وحشي وتسبب الموت. في تشريح، ونهاية الأمعاء هو جيد جدا وهشة.

ضع ما يقرب من سنتيمتر واحد من أنابيب السيليكون الدقيقة على إبرة قفل Luer عيار 31. قطع معقمة 10 ميكرولتر مرشح ماصة تلميح، واتخاذ نهاية أدق، ووضعها على أنبوب السيليكون كما اغرد. للبدء، إرفاق جهاز إبرة إلى حقنة 100 ميكرولتر لور لوك.

أولاً، نقل السمكة إلى الصهاريج التجريبية ليلة واحدة قبل التجربة. دوامة الحل جسيمات النانو المعدة جيدا، ورسم حجم المطلوب من التعليق. بعد تخدير الأسماك بأمان، استخدم شبكة لنقل الأسماك بسرعة إلى صينية بلاستيكية مبللة.

وجه الحيوان أفقيا لمواجهة الإبرة. دعم الأسماك بعناية بيد واحدة، وفتح الفم مع إبرة محمية. ثم، أدخل بلطف الإبرة أسفل المريء إلى حوالي سنتيمتر واحد من فتح الفم.

من الصعب أن نرى إلى أي مدى يجب أن تذهب الإبرة ، وهذه مسألة ممارسة. سوف تشعر الإبرة كما يجد وقف، ومن ثم عن طريق التلاعب الإبرة، ستجد زاوية الصحيح لإدراج الجهاز أكثر من ذلك بقليل. حقن ببطء تعليق الجسيمات النانوية في الأسماك، وضمان تعليق لا تتدفق إلى الخارج من خلال الخياشيم أو الفم.

بعد ذلك، قم بإزالة الإبرة بلطف، ووضع السمك في خزان الانتعاش. بينما يتعافى السمك، مراقبة الأسماك عن أي تشوهات. وبمجرد أن تتعافى الأسماك، إعادتها إلى أحد الصهاريج التجريبية.

بعد القتل الرحيم الأسماك وفقا لبروتوكول النص، ووضع الأسماك على قطعة من ورقة التصفية. باستخدام مقص تشريح حاد، وجعل شق شبه دائري من فتحة الشرج إلى operculum، وفتح شق مع ملاقط غرامة. ثم، قطع طرفي الأمعاء، إخراج جميع الأعضاء الداخلية، ووضعها على ورقة التصفية.

بعد ذلك ، افصل الأمعاء عن الأعضاء الداخلية ، وتمدها ، مع الحرص على الحصول على جميع الأمعاء. وأخيراً، استخدم ملاقط لفة الأمعاء على ورق التصفية لفصل الأنسجة اللاصقة. باستخدام هذا البروتوكول، تم بنجاح حمار وحشي من الجنس المختلط intubated مع جسيمات نانوية البروتين المؤتلف مختلفة.

وباستخدام جهاز الاحتضان الفموي منزلي الصنع، تم تحقيق متوسط منخفض للنسبة المئوية للوفيات. لتقييم تسليم جسيمات نانوية فلورية مصنوعة من أجسام TNF ألفا المؤتلفة، تم إجراء تحليل للمعالجة الفلورية. وكان إجمالي كمية الخلايا الفلورية أعلى بكثير في مجموعة الجسيمات النانوية المُنخَبة عنها في مجموعة التحكم بعد خمس ساعات و24 ساعة من النوبات.

معدات الاحتضان غير مكلفة ودقيقة وقابلة لإعادة الاستخدام. يمكن إجراء النوبات بالكامل بسرعة كبيرة من قبل مشغل واحد ، والأهم من ذلك ، أن الطريقة متسقة بين المشغلين المختلفين. يمكن أن يكون الجمع بين طريقة النوب مع تحليل المصب مثاليًا لتطوير اللقاح الفموي.