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基于 crispr-cas9 的基因组工程, 用于生成 hiv-1 感染与选定的证明病毒整合点的 jurkat 报告模型
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Immunologie et infection
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Journal JoVE Immunologie et infection
CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites
DOI:

14:27 min

November 14, 2018

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:42Choice of Targeted Locus, Guide RNA (gRNA), and Targeting Vector Design
  • 03:08CRISPR-Cas9-based Targeting of Jurkat Cells
  • 04:36Generation of Clonal Lines and Screening for Correct Targeting
  • 07:50Screening of Single-cell Clones by Flow Cytometry and PCR
  • 11:46Results: Screening and Analysis of Single-cell Clones for Correct Reporter Integration
  • 13:16Conclusion

Summary

Traduction automatique

我们提出了一个基因组工程工作流程, 用于生成新的 hiv-1 感染体外模型, 在选定的基因组站点重新构建天际整合。利用 crispr-cas9 介导的、特定地点的基因组操作, 为针对艾滋病毒来源的记者提供了便利。提供了单细胞克隆生成、筛选和正确目标验证的详细协议。

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