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Ingeniería de genoma CRISPR Cas9 basado en generar modelos de Jurkat reportero para infección por VIH-1 con los sitios seleccionados integración Proviral
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Chapitres
- 00:04Titre
- 00:42Choice of Targeted Locus, Guide RNA (gRNA), and Targeting Vector Design
- 03:08CRISPR-Cas9-based Targeting of Jurkat Cells
- 04:36Generation of Clonal Lines and Screening for Correct Targeting
- 07:50Screening of Single-cell Clones by Flow Cytometry and PCR
- 11:46Results: Screening and Analysis of Single-cell Clones for Correct Reporter Integration
- 13:16Conclusion
Presentamos un flujo de trabajo de ingeniería de genoma por la generación de nuevos modelos in vitro para la infección por VIH-1 que recapitular integración proviral en sitios genómicos. Ataques contra reporteros derivados del VIH es facilitada por la manipulación del genoma mediada por Cas9 CRISPR, site-specific. Cuentan con protocolos detallados unicelular clon generación, detección y verificación dirigida a corregir.
