This content is Free Access.
Chapitres
- 00:04Titre
- 01:01Harvesting of Arabidopsis Leaves
- 02:26Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation
- 03:30Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient
- 04:51Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients
- 06:05Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems
- 07:09Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
- 08:44Conclusion
Här, vi beskriver en metod för att rena intakt kloroplaster från Arabidopsis blad och deras tre sub huvudfack (kuvert, stroma, och thylakoids), med en kombination av differential centrifugations, kontinuerlig Percoll lutningar, och diskontinuerliga sackaros övertoningar. Metoden är värdefull för subplastidial och subcellulär lokalisering av proteiner av immunoblotting och proteomik.
