Journal
/
Biochimie
/
Hoe te kwantificeren van de Fractie van Photoactivated fluorescerende eiwitten in Bulk en in levende cellen
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
How to Quantify the Fraction of Photoactivated Fluorescent Proteins in Bulk and in Live Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Hoe te kwantificeren van de Fractie van Photoactivated fluorescerende eiwitten in Bulk en in levende cellen

DOI:
10.3791/58588-v

•

11:03 min

•

January 07, 2019

•

,
1Gynecologic Oncology Division,Stanford University School of Medicine

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:20Cell Culture and Transfection
  • 02:31Imaging and Photoactivation
  • 05:45Imaging Analysis and Algorithm for Ratiometric Intensity-based Quantification of Photoactivation Efficiency
  • 09:09Results: Maximizing Photoactivation Efficiency
  • 09:50Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Hier presenteren we een protocol waarbij genetisch gekoppelde spectraal verschillende photoactivatable en fluorescente proteïnen. Deze TL proteïne Chimaera toestaan kwantificering van de PA-FP-breuk thats photoactivated als tl, dat wil zeggen, de efficiëntie van de photoactivation. Het protocol blijkt dat verschillende vervoerswijzen photoactivation verschillende photoactivation efficiëntieverbeteringen opleveren.

Tags

Photo-activatable Fluorescent ProteinsPA-GFPPA-CherryFluorescence MicroscopyProtein ExpressionQuantificationLive CellsInternal RulersGenetically Coupled Fluorescent Proteins

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Thermostabilization, expressie, zuivering en kristallisatie van het Human serotonine transporter Gebonden aan<em> S</em> citalopram

Dissipatief Microgravimetry te bestuderen van de dynamiek van de Binding van de fosfolipide bindend proteïne Annexine A2 aan lipide Solid-ondersteund Bilayers met behulp van een Resonator Quartz

Wijzigen Baculovirus expressievectoren voor de productie van plantaardige eiwitten in Insect cellen uitgescheiden

Fluorescerende zilveren kleuring van eiwitten in Polyacrylamide Gels

Met behulp van hoog gehalte Imaging om te kwantificeren Target Engagement in Adherente cellen

Gebruik van recombinante Fusion eiwitten in een fluorescerende Protease Assay Platform en hun In-gel renaturatie

Analyse van de vouwing van eiwitten, vervoer en afbraak in levende cellen door radioactieve Pulse Chase

Lokalisatie van SUMO-gemodificeerde eiwitten met behulp van fluorescerende Sumo-trapping eiwitten

Analyse van de interactie van fluorescerende gelabelde eiwitten met kunstmatige fosfolipide microvesicles met behulp van kwantitatieve flowcytometrie

Zuivering van ubiquitinated p53-eiwitten uit zoogdiercellen

Read Article