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Chapitres
- 00:00Titre
- 01:05Generation of the Substrate-coding Expression Plasmids
- 02:16Expression of the Fluorescent Substrates
- 03:35Cell Disruption
- 04:26Ni-NTA Magnetic Agarose Bead-based Protease Assay
- 12:39PAGE Analysis
- 14:41Representative Results
- 18:29Conclusion
Qui, presentiamo la procedura dettagliata di una piattaforma di analisi sviluppata di recente proteasi che utilizza N-terminale hexahistidine/maltosio-proteina e substrati ricombinante fusi con proteine fluorescenti attaccati alla superficie di nichel-nitrilotriacetico acido dell'agarosi magnetico perline. Una successiva analisi in gel dei campioni test separati da elettroforesi dodecilica del gel del solfato-poliacrilammide di sodio inoltre è presentata.
