Journal
/
Biochimie
/
Användning av rekombinanta fusionsproteinerna i en fluorescerande proteas Assay plattform och deras i-gel utvinningsarbete
Journal JoVE
Biochimie
Author Produced
This content is Free Access.
Journal JoVE Biochimie
Use of Recombinant Fusion Proteins in a Fluorescent Protease Assay Platform and Their In-gel Renaturation
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Användning av rekombinanta fusionsproteinerna i en fluorescerande proteas Assay plattform och deras i-gel utvinningsarbete

DOI:
10.3791/58824-v

•

19:23 min

•

January 16, 2019

•

, , , ,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology, Faculty of Medicine,University of Debrecen, 2Biotechnology Research Department,Gedeon Richter Plc

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:05Generation of the Substrate-coding Expression Plasmids
  • 02:16Expression of the Fluorescent Substrates
  • 03:35Cell Disruption
  • 04:26Ni-NTA Magnetic Agarose Bead-based Protease Assay
  • 12:39PAGE Analysis
  • 14:41Representative Results
  • 18:29Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Här presenterar vi de detaljerade anvisningar av en nyligen utvecklad proteas assay plattform använder N-terminala hexahistidine/maltos-bindande protein och fluorescerande protein-smält rekombinant substrat kopplad till ytan av nickel-nitrilotriacetic sura magnetiska agaros pärlor. Efterföljande i-gel analys av assay proverna åtskilda av sodium dodecyl sulfate-polyakrylamid gelelektrofores presenteras också.

Tags

Recombinant Fusion ProteinsFluorescent Protease AssayIn-gel RenaturationHIV-1 ProteaseHigh-throughput ScreeningFluorescence-based AssayProtein ExpressionCleavage SiteBL21(DE3) CellsPlasmid Construction

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/58824?article_type=v

Mycket känslig och kvantitativa påvisande av proteiner och deras isoformer av kapillär isoelektrisk fokusering metod
check_url/fr/58824?article_type=v

En hög genomströmning luciferas analysen att utvärdera proteolys av enda-omsättning proteas PCSK9
check_url/fr/58824?article_type=v

Isolering av fysiologiskt aktiva Thylakoids och deras användning i energi-beroende Protein Transport analyser
check_url/fr/58824?article_type=v

Hur att kvantifiera fraktionen av Photoactivated fluorescerande proteiner i Bulk och i levande celler
check_url/fr/58824?article_type=v

Fluorescerande silverfärgning av proteiner i polyakrylamidgeler
check_url/fr/58824?article_type=v

Lokalisering av SUMO-modifierade proteiner med fluorescerande Sumo-fångst proteiner
check_url/fr/58824?article_type=v

Mätning av interaktioner mellan fluorescerande sonder och lignin i Plant sektioner av sFLIM baserat på ursprunglig Autofluorescence
check_url/fr/58824?article_type=v

Karakterisera cellulära proteiner med In-cell Snabb fotokemisk oxidation av proteiner
check_url/fr/58824?article_type=v

Tvärgående sektionering av moget ris (Oryza sativa L.) Kärnor för skanning av elektronmikroskopiavbildning med pipettespetsar som immobiliseringsstöd
check_url/fr/58824?article_type=v

Plattformsinkubator med rörlig XY-scen: En ny plattform för implementering av snabbfotokemisk oxidation av proteiner i celler

Read Article