Name: Basso costo protocollo di analisi dellimpronta e appendere casella Test per topi applicato lo Stress cronico ritenuta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: Impara l'analisi dell'andatura nei topi per valutare i disturbi del movimento usando un protocollo a basso costo con test della scatola sospesa. Questo metodo rileva fenotipi motori dopo stress cronico senza effetti spontanei.

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Questo lavoro è stato supportato da JSP (Japan Society for Promotion of Science) KAKENHI (sovvenzione per Scientific Research C), concedere numero 18K 07373 (A.S.) e sovvenzioni per le Università Private.

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti in maniera umana. Istituzionali animale esperimento Comitato di Jichi Università medica approvato lo studio. Lo studio è stato condotto in conformità con il regolamento istituzionale per esperimento animale e linea guida fondamentale per condotta corretta di esperimento di animali e attività connesse nelle istituzioni accademiche di ricerca sotto la giurisdizione del MEXT del Giappone. Topi usati in questo protocollo sono state descritte in precedenza21.
1. Test di scatola d'attaccatura
<ol><li>Registrare il peso di ogni topo. Contrassegnare la coda dalla penna di marcatura per discriminazione individuale (ad es.., una linea, doppie linee e linee triple). Nota: Curve di crescita sono utilizzate per un indice di salute generale22.</li>
	<li>Posizionare i topi nella camera sperimentale almeno 30 min prima del test comportamento. Impostare il riquadro sporgente, che consiste in una scatola trasparente (25 x 25 x 40 cm3) con un coperchio girevole mesh in alto a sinistra (Figura 1). Il coperchio della maglia può essere ruotato lungo una barra centrale affinché la parte superiore viene capovolta di 180 gradi.</li>
	<li>Mettere un mouse al centro del coperchio della maglia. Con attenzione abbassare il coperchio di maglie a lato.</li>
	<li>Misurare la latenza di caduta (tempo di sospensione) del mouse dal coperchio della maglia. Nota: Se il mouse non rientra entro 5 min, registrare la latenza come 5 min.</li>
	<li>Tornare il mouse dalla gabbia. Pulire la scatola d'attaccatura con etanolo al 70% dopo ogni test.</li>
</ol>2. analisi dell'impronta
Nota: In seguito il riquadro sporgente test, eseguire l'analisi dell'impronta.
<ol><li>
Impostare il Runway (Figura 2A).<ol>
<li>Tagliare un pezzo di carta bianca (29,7 x 42 cm x 0,09 mm) longitudinalmente in tre lunghezze di uguale larghezza. Impostare un pezzo di carta bianco (9,9 x 42 cm) sul tavolo.</li>
		<li>Mettete la scatola scuro obiettivo all'estremità distale della carta. Mettere altro scatole (circa la stessa lunghezza di quello della carta) con le pareti su entrambi i lati della pista, impedire la fuga dei topi.</li>
		<li>Mettere inchiostro nero e inchiostro rosso in piatti separati di Petri (35 mm di diametro).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sessione di allenamento. Nota: Eseguire la sessione di allenamento solo a 4 settimane di età.<ol>
<li>Mettere un mouse sull'estremità prossimale della carta (volto la testa verso la casella di obiettivo). Lasciare che il mouse a piedi dall'estremità prossimale alla casella di obiettivo. Rimuovere il mouse dalla casella di obiettivo. Se il mouse si ferma sulla carta, spingere delicatamente il mouse alla casella obiettivo dal dito.</li>
		<li>Tenere premuto il mouse afferrando la collottola tra il pollice e l'indice per limitare il movimento delle zampe anteriori. Quindi, afferrare il dorso e la coda tra la sfera del pollice e le altre dita per limitare il movimento delle zampe posteriori. Nota: Insufficiente tenuta del mouse provoca macchie di inchiostro sui vestiti.</li>
		<li>Immergere le parti inferiori delle zampe anteriori in inchiostro rosso e le parti inferiori delle zampe posteriori in inchiostro nero. Mettere immediatamente il mouse sull'estremità prossimale della carta (volto la testa verso la casella di obiettivo). Lasciare che il mouse a piedi dall'estremità prossimale alla casella di obiettivo. Se il mouse si ferma sulla carta, spingere delicatamente il mouse alla casella obiettivo dal dito.</li>
		<li>Rimuovere il mouse dalla casella di obiettivo. Andare per la sessione di test.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sessione di test.
	<ol>
<li>Dopo la sessione di allenamento, impostare la pista per impronte con un nuovo pezzo tagliato di carta bianca.</li>
		<li>Tenere premuto il mouse afferrando la collottola tra il pollice e l'indice per limitare il movimento delle zampe anteriori. Quindi, afferrare il dorso e la coda tra la sfera del pollice e le altre dita per limitare il movimento delle zampe posteriori.</li>
		<li>Immergere le parti inferiori delle zampe anteriori in inchiostro rosso e le parti inferiori delle zampe posteriori in inchiostro nero. Mettere immediatamente il mouse sull'estremità prossimale della carta. Lasciare che il mouse a piedi dall'estremità prossimale alla casella di obiettivo. Nota: Perché topi preferiscono il buio, camminare diventa più costante mentre il mouse si avvicina la casella obiettivo scuro. Se il mouse si ferma sulla carta, spingere delicatamente il mouse alla casella obiettivo dal dito. Quindi, se affidabile impronte non sono ottenute per l'analisi (vedere il punto 2.4. Analisi delle impronte per dettagli) perché il mouse ha smesso, riprovare a eseguire la sessione di test.</li>
		<li>Tornare alla gabbia a casa il mouse dalla casella di obiettivo. Pulire la scatola di obiettivo con etanolo al 70% dopo ogni sessione di test. Asciugare la carta stampata a piedi.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Analisi di impronte
	<ol>
<li>Ottenere tre misurazioni di ogni parametro (lunghezze di arti anteriori e posteriori, anteriori e posteriori larghezze base della falcata, si sovrappongono tra arto anteriore e arto posteriore, fig. 2B) con un righello da carta stampata a piedi. Nota: Perché impronte dell'estremità prossimale e distale spesso mostrano ampie variazioni a causa di arresto o in esecuzione, scegliere la parte con un modello di andatura costante delle orme. La parte centrale della carta stampata in piedi solitamente sarà adatta per l'analisi.<ol>
<li>Per la lunghezza della falcata, misurare le distanze tra le stesse parti della zampa (ad es., zampa pad o punta).</li>
			<li>Per la larghezza della base anteriore, tracciare una linea tra consecutivi orme anteriore destro (o sinistro). Quindi, misurare la lunghezza della linea verticale dal tampone dell'impronta anteriore sinistro (o destro) per la linea tracciata tra le impronte di destra (o sinistra).</li>
			<li>Per la larghezza della base posteriore, tracciare una linea tra consecutive impronte posteriori destra (o sinistra). Quindi, misurare la lunghezza della linea verticale dal tampone dell'impronta posteriore sinistro (o destro) per la linea tracciata tra le impronte di destra (o sinistra).</li>
			<li>Per sovrapposizione, misurare la distanza tra pastiglie di sinistra (o destra) anteriori e posteriori delle impronte.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Media delle tre misurazioni per ogni individuo. Utilizzare la media individuale di ciascun parametro per l'analisi statistica.<ol>
<li>Per la lunghezza della falcata, utilizzare la media delle medie individuali dei passi avanti sinistra e destra.</li>
			<li>Asimmetria di lunghezza della falcata, utilizzare il valore assoluto della differenza tra medie individuali dell'arto sinistro e lunghezza della falcata arto destro.</li>
			<li>Per l'analisi statistica degli altri parametri (larghezza base frontale, Larghezza base posteriore e sovrapposizione), utilizzare la media individuale direttamente.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. sistema di ritenuta Stress caricamento
<ol><li>
Preparazione dei tubi di contenimento.
	<ol>
<li>Fare 16 fori (circa 2 mm di diametro) in una provetta conica da 50 ml (30 mm di diametro x 115 mm di lunghezza) lungo i segni di scala (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 mL) e il retro di ogni scala per contrassegnare quadrato trapano (Figura 3). Fare un buco sulla punta del tubo conico 50 mL (circa 5 mm di diametro) per la respirazione, tagliando la punta. Praticare un foro (circa 4 mm di diametro) nel tappo tubo per passare la coda di topi.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Carico di stress
	<ol>
<li>Posizionare i topi in camera sperimentale.</li>
		<li>Tenere un mouse afferrando la collottola tra il pollice e l'indice. Inserire il tubo di contenimento il mouse dalla testa. Passare la coda attraverso il foro nel tappo. Chiudere il tappo. Nota: Limitare il movimento degli arti anteriori, perché topi rifiutano di entrare nella cannula di quelle anteriori.</li>
		<li>Tenere il mouse racchiuso per 2 h su un banco a temperatura ambiente. Rimuovere il mouse dal tubo di moderazione e tornare alla gabbia a casa. Nota: I tubi di ritenuta possono essere riutilizzati dopo il lavaggio e asciutto.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. sperimentale pianificazione (Figura 4):
<ol><li>L'impiccagione di eseguire test e l'analisi dell'impronta della scatola lo stesso giorno alle 4 settimane di età (vedere il passaggio 1. Test di scatola d'attaccatura e il passaggio 2. Analisi dell'impronta per dettagli) come una misurazione di base su tutti i topi prima del raggruppamento in 'gruppo di sollecitazione' e un 'non-sollecita group'. Nota: Circa 8-10 topi in 2-3 cucciolate possono essere adatti da utilizzare in un esperimento. Analisi dell'impronta a 4 settimane di età è costituito da sessioni di training e di test.</li>
	<li>Dividere in modo casuale i topi in un gruppo di' stress' e un 'non-sollecita group'. Nota: Quando i topi sono utilizzati che consiste di diverse cucciolate, dividere littermates uniformemente in entrambi i gruppi. Numero in ogni gruppo è costituito da circa 4-5 topi.</li>
	<li>Applicare lo sforzo del fermo per il gruppo di' sforzo' 6 volte nel corso di due settimane (vedere il passaggio 3. Sforzo del fermo di caricamento per i dettagli). Nota: 6 volte di contenimento vengono applicate ogni due settimane, seguita da una sospensione casella Analisi test e impronta da 6-12 settimane di età. Non applicare lo sforzo del fermo il giorno dell'esame dell'impiccagione box test e l'analisi dell'impronta.</li>
	<li>Eseguire l'impiccagione casella test e la sessione di test di analisi dell'impronta sullo stesso giorno alle ore 6, 8, 10 e 12 settimane di età.</li>
</ol>

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<li>Cecchi, M., Khoshbouei, H., Morilak, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulatory+effects+of+norepinephrine%2C+acting+on+alpha1+receptors+in+the+central+nucleus+of+the+amygdala%2C+on+behavioral+and+neuroendocrine+responses+to+acute+immobilization+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Modulatory effects of norepinephrine, acting on alpha1 receptors in the central nucleus of the amygdala, on behavioral and neuroendocrine responses to acute immobilization stress.</a> Neuropharmacology. 43 (7), 1139-1147 (2002).</li>
<li>Chu, X., Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((24-hour-restraint+stress+induces+long-term+depressive-likephenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">24-hour-restraint stress induces long-term depressive-likephenotypes in mice.</a> Scientific Reports. 6, 32935(2016).</li>
<li>Freeman, M. L., Sheridan, B. S., Bonneau, R. H., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychological+Stress+Compromises+CD8%2B+T+cell+control+of+latent+herpes+simplex+virus+type+1+infections%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Psychological Stress Compromises CD8+ T cell control of latent herpes simplex virus type 1 infections.</a> The Journal of Immunology. 179 (1), 322-328 (2007).</li>
<li>Lauretti, E., Di Meco, A., Merali, S., Praticò, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+behavioral+stress+exaggerates+motor+deficit+and+neuroinflammation+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Chronic behavioral stress exaggerates motor deficit and neuroinflammation in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Translational Psychiatry. 6, e733(2016).</li>
<li>Quartermain, D., Stone, E. A., Charbonneau, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+stress+disrupts+risk+assessment+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Acute stress disrupts risk assessment behavior in mice.</a> Physiology and Behavior. 59 (4-5), 937-940 (1996).</li>
<li>Bannon, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBannon%2C+D+%22The+Behavioural+effects+of+stress+and+aluminum+toxicity+on+a+mouse+model+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+Parkinsonism-dementia+complex%22">The Behavioural effects of stress and aluminum toxicity on a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis Parkinsonism-dementia complex</a>. , 1-186 (2015).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

L'analisi dell'impronta e il riquadro sporgente di test sono test comportamentali semplici e poco onerose per la funzione motoria dei topi. I fenotipi di neurobehavioral in diversi modelli di mouse sono stati rilevati con successo da queste prove. Ad esempio, accorciato la lunghezza della falcata nella sclerosi laterale amiotrofica24, maggiore lunghezza della falcata asimmetrica all'atassia-telangiectasia25, maggiore lunghezza di sovrapposizione nella malattia di Huntington...

Disordini di movimento sono definiti come disturbi del sistema nervoso mostrando un eccesso o scarsità di movimenti volontari o automatico1. In particolare, disturbi dell'andatura sono frequentemente documentato tra i pazienti con i disordini di movimento2,3,4. Pertanto, l'analisi del passo è un idoneo test comportamento per la validazione di modelli animali di disordini di movimento. Nei topi, sono state effettuate analisi automatizzata di andatura per camminare a velocità naturale5 ed a velocità regolabile da tapis roulant6,7. Queste analisi forniscono risultati quantitativi di andatura automaticamente. Un metodo alternativo per rilevare la dispersione di andatura è chiamato analisi dell'impronta. Dopo l'etichettatura le parti inferiori dei piedi con inchiostro, topi cammino sulla carta, e le impronte vengono analizzate. Inizialmente, vaselina e polvere di carbone sono stati utilizzati per visualizzare l' impronta8e quindi sono stati sostituiti da inchiostro il poligrafo carta9 e dello sviluppatore fotografico su carta fotografica10. Un metodo più economico e meno tossico utilizzando inchiostro e carta rispetto agli altri metodi rimane ad oggi11. Analisi dell'impronta sono meno costoso rispetto con analisi automatica5,6,7 e sarebbero utile per valutare i disordini di movimento in modelli murini per i ricercatori senza fondi di ricerca abbondante .
L'impiccagione prova box è una sorta di quattro test di attaccatura degli arti mediante filo gabbia coperchio12 e rete metallica schermata13. La scatola è un apparato con coperchio girevole maglia sulla parte superiore del riquadro lungo una barra centrale. Oltre alle analisi del passo, il test può essere a buon mercato e facilmente eseguito. Di conseguenza, abbiamo condotto l'impiccagione test box per valutare la forza prensile ed equilibrio, inoltre per l'analisi dell'impronta in questo protocollo.
Lo stress induce i sintomi di disturbi di movimento14,15. I deficit del motore sono spesso indotte da diversi stress cronico anche quando nessun fenotipo motore spontaneo è osservato nei modelli del mouse di un disordine di movimento16,17,18. Moderazione è uno dei metodi comunemente usati per lo sforzo di caricamento nei topi, perché l'animale non è fisicamente danneggiato19 e il costo è inferiore rispetto ad altri metodi come scosse elettriche con apparecchio dedicato e costretto in esecuzione con l'uso di un tapis roulant. Ritenuta da un tubo, che è eseguito da confinare un topo in una provetta conica forata 50 mL, è più facile di altri metodi come filo maglia colino, arto nastrata e avvolgimento di animale con garza (Recensito il20). In questa carta, riassumiamo i protocolli dell'impronta analisi e il riquadro sporgente test dopo ritenuta da un tubo. Questo protocollo ci aiuterebbe ad utilizzare modelli murini di disordini di movimento senza fenotipo motore spontanea.

<table><tbody><tr><td>Scatola sospesa</td><td>O' hara & Co.</td><td>http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/</td><td></td></tr> <tr><td>Pennarello</td><td>ZEBRA</td><td>MO-120-MC-BK</td><td></td></tr><tr><td>Scatola porta</td><td>O' hara & Co.</td><td>http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/</td> <td>Accessorio per apparecchi di test a fascio bilanciato</td></tr><tr><td>Scatole</td><td>O' hara & Co.</td><td>-</td><td>Parete laterale della pista</td></tr><tr><td>Inchiostro nero</td><td>Shin-asahi-Inchiostro</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>rosso</td><td>Maruyamakogyo</td><td>BC-6</td><td></td></tr><tr><td>Piastra di Petri monouso</td><td>Corning</td><td>351008</td><td>Piastre di Petri (35 mm di diametro)</td></tr><tr><td>Askul Multipaper Super White J Monochrome A3</td><td>Askul</td><td>701-712</td><td>Carta bianca (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm)</td></tr><tr><td>50 mL Tubo conico</td><td>Corning</td><td></td><td></td>430829</tr><tr><td>Trapano quadrato</td><td>KAKURI Corporation</td><td>FABBRICA FAI DA TE (K32-0313)</td><td></td></tr></tbody></table>

basso costo protocollo di analisi dell'impronta e appendere casella test per topi applicato lo stress cronico ritenuta

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Dispersione di andatura è osservata frequentemente in pazienti con disordini del movimento. In modelli murini utilizzati per disturbi del movimento, analisi del passo è importante test comportamentali per determinare se i topi imitano i sintomi dei pazienti. Deficit motori sono spesso indotte da stress quando nessun fenotipo motore spontaneo è osservato nei modelli del mouse. Pertanto, analisi del cammino seguito da carico sarebbe un metodo sensibile per la valutazione del fenotipo motore in modelli murini. Tuttavia, i ricercatori devono affrontare il requisito di un apparecchio costoso per ottenere risultati quantitativi automaticamente da analisi del passo. Per lo stress, lo sforzo di caricamento con metodi semplici senza costosi apparati necessari per scosse elettriche e costretto in esecuzione è auspicabile. Di conseguenza, introduciamo un protocollo semplice e a basso costo, costituito da analisi dell'impronta con carta e inchiostro, appeso test box per valutare la funzione di motore e carico di stress definiti da fermo con un tubo conico. Il deficit del motore dei topi sono stati correttamente rilevati dal presente protocollo.

I topi eterozigoti maschi di Atp1a3 (Atp1a3+ / −) che sono il modello di topo per la rapida insorgenza distonia parkinsonismo e littermates selvaggio-tipo sono stati utilizzati in questo protocollo. Atp1a3+ / − ha mostrato significativamente più brevi lunghezze di falcata della zampa anteriore e hindlimb rispetto a quelli di tipo selvatico a 4 settimane di età (Figura 5A e 5B figura</strong...

Il protocollo di basso costo consistente di analisi dell'impronta e appeso prova box dopo lo sforzo del fermo è utile per valutare i disordini di movimento di modello del topo.

Basso costo protocollo di analisi dell'impronta e appendere casella Test per topi applicato lo Stress cronico ritenuta

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...

Il nostro protocollo che utilizza l'analisi dell'andatura è molto utile per determinare se i motori del mouse dei disturbi del movimento imitano il sintomo del paziente con disturbo dell'andatura. Quindi, l'analisi dell'andatura nella prova di carico dello stress può essere eseguita facilmente e senza attrezzature costose, per rilevare alcuni fenotipi motori nei topi, senza effetti spontanei. Prima di iniziare il test comportamentale, registrare il peso di ogni mouse e utilizzare una penna di marcatura per etichettare ogni coda.Quando tutti gli animali sono stati pesati e contrassegnati, posizionare i topi nella stanza sperimentale per almeno 30 minuti e impostare una scatola sospesa chiara, 25 per 25 per 40 centimetri, con un coperchio in rete girevole, sulla panchina del laboratorio. Quando i topi si sono acclimatati, posizionare un mouse al centro del coperchio della rete e capovolgere accuratamente il coperchio. Quindi, misura la latenza di caduta del mouse dal coperchio della rete, prima di riportare il mouse nella sua gabbia domestica.Una volta che tutti i topi sono stati testati, posizionare un pezzo di carta bianca da 9,9 per 42 centimetri sul banco di laboratorio e posizionare una scatola di obiettivi scuri all'estremità distale della carta. Posizionare altre scatole, approssimativamente della stessa lunghezza della carta, su entrambi i lati della pista per evitare la fuga. E aggiungere inchiostro nero e rosso per separare 35 millilitri piastre di Petri.Per addestrare i topi per l'analisi, posizionare un mouse all'estremità prossimale della carta, rivolto verso la scatola degli obiettivi, e lasciare che il mouse cammini dall'estremità prossimale della carta alla scatola degli obiettivi. Quando il mouse raggiunge la scatola, scruffare delicatamente l'animale, infilando la schiena e la coda tra la palla del pollice e le altre dita, per limitare il movimento degli arti posteriori. E immergere i fondi degli arti anteriori in inchiostro rosso, e la parte inferiore degli arti posteriori in inchiostro nero.Quindi, riposizionare immediatamente il mouse sull'estremità prossimale della carta, rivolto verso la scatola degli obiettivi, e lasciare che il mouse cammini dall'estremità prossimale alla scatola degli obiettivi. Dopo aver asciugato ad aria la carta stampata a piedi, utilizzare un righello per ottenere tre misurazioni della lunghezza della falcata, misurando le distanze tra le stesse parti delle impronte delle zampe. Della larghezza della base anteriore, disegnando una linea tra impronte anteriori consecutive, uguali e misurando la lunghezza della linea verticale dal pad dell'ingombro anteriore, alla linea tracciata tra le impronte.E della larghezza della base posteriore, disegnando una linea tra impronte posteriori destra consecutive e misurando la lunghezza della linea verticale dal pad dell'ingombro posteriore sinistro, alla linea tracciata tra le altre impronte destra. Per la sovrapposizione, misurare la distanza tra i cuscinetti delle impronte anteriori e posteriori. Per preparare un tubo di ritenuta, utilizzare un trapano quadrato per realizzare fori di 16 due millimetri in un tubo da 50 millilitri lungo i segni di scala e sul retro di ogni segno di scala.Tagliare la punta del tubo per fare un foro di cinque millimetri, per respirare, e fare un foro di quattro millimetri nel tappo del tubo, per la coda. Per la prova di carico dello stress, scruffare un topo e posizionare prima l'animale nella testa del tubo di contenimento, con gli arti anteriori delicatamente confinati. Passare la coda attraverso il foro nel cappuccio prima di tappare il tubo.E posizionare il mouse sulla parte superiore della panca per due ore a temperatura ambiente. Alla fine del periodo di carico dello stress, rimuovere il mouse dal tubo e riportare l'animale nella sua gabbia di casa. Come osservato in queste figure rappresentative, eterozigoti topi modello di distonia a esordio rapido Parkinsonismo, dimostrano lunghezze del passo della parte posteriore e posteriore significativamente più corte, rispetto ai loro compagni di lettiera di tipo selvaggio a quattro settimane di età.Stress eterozigote distonia ad esordio rapido Parkinsonismo modello topi, mostrano anche lunghezze del passo significativamente più brevi di entrambi gli arti rispetto a quelle dei compagni di lettiera stressati di tipo selvatico a otto settimane di età. Le asimmetrie delle lunghezze del passo di entrambi gli arti non sono significativamente diverse, in nessun gruppo di topi, a qualsiasi età. Anche la base anteriore e le sovrapposizioni di entrambi gli arti sono simili, in tutti i gruppi, a tutte le età.La base posteriore è significativamente più ampia in questi topi modello di distonia a esordio rapido eterozigote stressati, rispetto a quella osservata negli animali di tipo selvatico a 10 settimane di età, indicando che lo stress causa deficit motori nei topi modello di distonia a esordio rapido eterozigote. Non si osservano differenze significative nel tempo di sospensione, tra tipo selvaggio e mutante, negli animali di quattro o 10 settimane. A 12 settimane di età, tuttavia, il tempo di sospensione dei topi di tipo selvatico da stress è significativamente più lungo di quello degli altri animali, suggerendo che il deficit motorio nei topi modello di distonia a esordio rapido eterozigote, è distinguibile dai topi di tipo selvatico mediante test di ritenuta negli animali più anziani.Posizionare il mouse sulla carta immediatamente dopo che il mouse appende i fondi degli arti nell'inchiostro per evitare che l'inchiostro si asciughi prima del test di camminata. Ulteriori test per le caratteristiche emotive, come campo aperto, plus-laze elevato e test di nuoto intero, possono essere eseguiti per rispondere se l'anomalia dell'andatura deriva solo da deficit motorio. Il nostro protocollo può essere utilizzato per esplorare la suscettibilità allo stress, modificando il numero e la durata del carico di stress e confrontando i fenotipi del motore tra le varie condizioni di carico.Il nostro protocollo può essere utilizzato per esplorare la suscettibilità allo stress modificando il numero e la durata dei carichi di sollecitazione e confrontando i fenotipi del motore tra le varie condizioni di carico.

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Research

Ricerca

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

La coda-sospensione in esame è convalidato come una procedura sperimentale per valutare l'efficacia di trattamenti farmacologici antidepressivi nei topi. I topi sono sospesi per la coda per sei minuti e la fuga comportamenti correlati sono valutati. Si descrivono le modalità utilizzate nella conduzione della prova sospensione coda.

La coda di test Sospensione

In questo video, descriviamo la procedura di test dell'impronta e la relativa analisi per valutare l'andatura e la coordinazione motoria nei topi.

Valutazione dell'andatura mediante analisi dell'impronta: un metodo per testare la coordinazione motoria nei topi

Il protocollo UCMS (Unpredictable Chronic Mild Stress) è un metodo convalidato per studiare i cambiamenti comportamentali e fisiologici associati allo stress cronico e ai sintomi depressivi. Otto settimane dall'imposizione del protocollo UCMS inducono cambiamenti comportamentali e scarsi risultati di salute nei roditori di entrambi i sessi.

Un Imprevedibile cronica protocollo stress lieve per i sintomi depressivi Istigazione, cambiamenti comportamentali e negativi risultati di salute in Roditore

Qui vi presentiamo il protocollo sforzo delicato cronico imprevedibile nei topi. Questo protocollo induce un fenotipo simile a depressione a lungo termine e permette di valutare l'efficacia degli antidepressivi putativi a invertire i deficit di tipo di depressiva comportamentistici e neuromolecular.

Il protocollo di sforzo delicato cronico imprevedibile per indurre anedonia in topi

Una batteria di test del comportamento globale delle capacità motorie, umore — tra cui l'interazione sociale, depressione e ansia — e cognizione è progettato per la valutazione ripetuta di cambiamenti comportamentistici neurodegeneration in topi.

Una batteria di Test comportamentali per la valutazione ripetuta di abilità motorie, l'umore e cognizione in topi

Questo articolo fornisce un protocollo semplificato e standardizzato per l'induzione del comportamento depressivo in topi cronicamente immobilizzati utilizzando un rimboschimento. Inoltre, vengono spiegati il comportamento e le tecniche fisiologiche per verificare l'induzione della depressione.

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Il test di sicurezza della minaccia sociale consente una valutazione simultanea dello sviluppo dell'evitamento sociale come misura dell'apprendimento condizionato avversivo e della capacità di discriminazione della sicurezza della minaccia sociale, entrambi utilizzati per identificare individui suscettibili allo stress e resilienti allo stress all'interno di un singolo gruppo di topi maschi cronicamente socialmente sconfitti.

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Integrando quattro fattori di stress sociale giornaliero, il presente studio descrive un modello di stress sociale integrato multiplo (MISS) per i disturbi psichiatrici nei topi femmina C57BL/6J. Dopo dieci giorni di ripetuta esposizione a MISS, i topi hanno sviluppato fenotipi depressivi e ansiosi, fornendo così un modello animale naturale basato sull'eziologia per lo studio dei disturbi psichiatrici nei soggetti di sesso femminile.

Un modello di stress sociale integrato multiplo per disturbi psichiatrici in topi femmina C57BL/6J

Questo articolo copre le procedure per indurre risposte allo stress utilizzando lo stress di contenzione fisica nei topi e nei ratti. Vengono discusse ulteriori considerazioni che dovrebbero essere osservate quando si seleziona e si utilizza lo stress di ritenuta nei modelli di roditori.

Contenzione per indurre stress in topi e ratti

Impara l'analisi dell'andatura nei topi per valutare i disturbi del movimento usando un protocollo a basso costo con test della scatola sospesa. Questo metodo rileva fenotipi motori dopo stress cronico senza effetti spontanei.

Basso costo protocollo di analisi dell'impronta e appendere casella Test per topi applicato lo Stress cronico ritenuta

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