Analysis of Endocytic Uptake and Retrograde Transport to the Trans-Golgi Network Using Functionalized Nanobodies in Cultured Cells

Dominik  P. Buser; Martin Spiess

doi:10.3791/59111

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Análise de absorção endocítica e transporte retrógrado à rede Trans-Golgi usando funcionalizados Nanobodies em culturas de células

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Biochimie

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Analysis of Endocytic Uptake and Retrograde Transport to the Trans-Golgi Network Using Functionalized Nanobodies in Cultured Cells

Análise de absorção endocítica e transporte retrógrado à rede Trans-Golgi usando funcionalizados Nanobodies em culturas de células

DOI:

10.3791/59111-v

•

11:05 min

•

February 21, 2019

•

Dominik P. Buser, Martin Spiess

¹Biozentrum,University of Basel

Chapitres

00:04Titre
01:03Bacterial Liquid Culture and Induction of Functionalized Nanobody Expression
02:31Purification of Functionalized Nanobodies
04:14Validation of Functionalized Nanobody Expression
04:41Uptake of Functionalized Nanobodies by Cultured Cells
08:03Results: Analysis of Endocytic Uptake and Retrograde Transport to the Trans-Golgi Network
10:09Conclusion

Summary

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Transporte retrógrado de proteínas de superfície celular para o Golgi é essencial para manter a homeostase de membrana. Aqui, descrevemos um método para analisar bioquimicamente transporte de superfície-para-Golgi celular de proteínas recombinantes usando funcionalizados nanobodies em células HeLa.

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