Journal
/
Génétique
/
Lentiviral Vector plattform for effektiv levering av Epigenome-redigeringsverktøy i Human indusert Pluripotent Stamcelle-avledet sykdom modeller
Journal JoVE
Génétique
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Génétique
Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

Lentiviral Vector plattform for effektiv levering av Epigenome-redigeringsverktøy i Human indusert Pluripotent Stamcelle-avledet sykdom modeller

DOI:
10.3791/59241-v

•

13:47 min

•

March 29, 2019

•

, , , , , , , ,
1Department of Neurology,Duke University Medical Center, 2Center for Genomic and Computational Biology,Duke University Medical Center, 3Viral Vector Core,Duke University Medical Center, 4Division of Gynecologic Oncology, Department of Obstetrics and Gynecology,Duke University Medical Center

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 02:01Plasmid Design and Construction
  • 03:20HEK-293T Cells Culturing, Plating, and Transfection
  • 05:15Virus Harvesting and Viral Particles Concentrating
  • 08:16Transduction of MD NPCs
  • 09:48Analysis of Methylation Changes
  • 11:04Results: Assessment of the LV-dCas9-DNMT3A-GFP/Puro Vectors Compared to the Naive GFP Counterpart
  • 12:45Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Målrettet DNA epigenome redigering representerer en effektiv terapeutisk tilnærming. Denne protokollen beskriver produksjon, rensing og konsentrasjonen av alt-i-ett lentiviral vektorer skjuler CRISPR-dCas9-DNMT3A-transgene for epigenome-redigering programmer i menneskelig indusert pluripotent stilk cellen (hiPSC)-avledet neurons.

Tags

Lentiviral VectorEpigenome EditingHuman Induced Pluripotent Stem CellsDisease ModelsCRISPR/CasAlpha-synucleinGene ExpressionGuide RNAMolecular CloningPlasmid ConstructionNeural Progenitor CellsDNA Methyltransferase (DNMT3A)

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/59241?article_type=v

Systemisk levering av MicroRNA ved hjelp av rekombinant Adeno-assosiert Virus Serotype 9 til å behandle Neuromuscular sykdommen i gnagere
check_url/fr/59241?article_type=v

En matrise-basert sammenlignende Genomic hybridisering plattform for effektiv påvisning av kopi nummer variasjoner i rask Neutron-indusert Medicago truncatula mutanter
check_url/fr/59241?article_type=v

En protokoll for produksjon av Integrase dårlig Lentiviral vektorer for CRISPR/Cas9-mediert Gene Knockout i dele celler
check_url/fr/59241?article_type=v

Fosteret Microinjection og transplantasjon teknikk for Nasonia vitripennis genomet manipulasjon
check_url/fr/59241?article_type=v

Svært effektiv Gene avbrudd i Murine og menneskelig blodkreft stamfar celler av CRISPR/Cas9
check_url/fr/59241?article_type=v

Lentiviral formidlet produksjon av transgene mus: en enkel og svært effektiv metode for direkte av grunnleggerne
check_url/fr/59241?article_type=v

Isolering og karakterisering MicroRNA-baserte genetisk modifisering av menneskelig Dental hårsekken stamceller
check_url/fr/59241?article_type=v

Endogene Protein merking i menneskelig indusert Pluripotent stilk celler med CRISPR/Cas9
check_url/fr/59241?article_type=v

Isolere, sekvensering og analysere ekstracellulære MicroRNAs fra menneskelige stamceller
check_url/fr/59241?article_type=v

Lentiviral mediert gen demping i Human Pseudoislet forberedt på lav Vedleggs plater

Read Article