Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Titre
- 00:49The High Titer sgRNA Library Lentivirus Generation
- 01:44Titration of Lentiviral Library in MOLM13 Leukemia Cells
- 02:59Transduction of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library
- 04:20Screening of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library with One-Step RT-qPCR
- 05:41Verification of Integrated sgRNAs Positive Clones through Genotyping and Sanger Sequence
- 06:37Detection of sgRNAs Induced Indel Mutation by Nuclease Digestion Assay
- 07:48Results: Pooled CRISPR-Cas9 KO Library Screening and Identification
- 09:19Conclusion
En CRISPR/sgRNA bibliotek er blevet anvendt til spørgekriterierne protein-kodning gener. Dog stadig gennemførligheden af et sgRNA bibliotek til at afsløre funktionen af en CTCF grænse RIBOREGULATION uudforsket. Her beskriver vi et HOX loci specifikke sgRNA bibliotek for at klarlægge funktionen af CTCF grænser i HOX loci.
