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HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA 라이브러리 심사 식별 중요 CTCF 경계
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA Library Screening Identifying Critical CTCF Boundaries
DOI:

10:10 min

March 31, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:49The High Titer sgRNA Library Lentivirus Generation
  • 01:44Titration of Lentiviral Library in MOLM13 Leukemia Cells
  • 02:59Transduction of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library
  • 04:20Screening of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library with One-Step RT-qPCR
  • 05:41Verification of Integrated sgRNAs Positive Clones through Genotyping and Sanger Sequence
  • 06:37Detection of sgRNAs Induced Indel Mutation by Nuclease Digestion Assay
  • 07:48Results: Pooled CRISPR-Cas9 KO Library Screening and Identification
  • 09:19Conclusion

Summary

Traduction automatique

CRISPR/sgRNA 라이브러리 질의 단백질 코딩 유전자에 적용 되었습니다. 그러나, 유전자 규칙에서 CTCF 경계의 기능을 밝히기 위해 sgRNA 라이브러리의 미개척 남아 있습니다. 여기, 우리는 HOX loci 특정 sgRNA 라이브러리 CTCF 경계 HOX loci의 기능을 명료 하 게 설명 합니다.

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