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HOX Loci enfocado CRISPR/sgRNA biblioteca proyección identificación crítica CTCF límites
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA Library Screening Identifying Critical CTCF Boundaries
DOI:

10:10 min

March 31, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:49The High Titer sgRNA Library Lentivirus Generation
  • 01:44Titration of Lentiviral Library in MOLM13 Leukemia Cells
  • 02:59Transduction of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library
  • 04:20Screening of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library with One-Step RT-qPCR
  • 05:41Verification of Integrated sgRNAs Positive Clones through Genotyping and Sanger Sequence
  • 06:37Detection of sgRNAs Induced Indel Mutation by Nuclease Digestion Assay
  • 07:48Results: Pooled CRISPR-Cas9 KO Library Screening and Identification
  • 09:19Conclusion

Summary

Traduction automatique

Una biblioteca CRISPR/sgRNA ha sido aplicada a interrogar a genes de la proteína-codificación. Sin embargo, la factibilidad de una biblioteca sgRNA para descubrir la función de un límite CTCF en Regulación génica sigue siendo inexplorada. Aquí, describimos una biblioteca de sgRNA específicos HOX loci para aclarar la función de los límites CTCF en loci HOX .

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