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ट्यूमर कोशिकाओं में MicroRNA स्तर, कार्यों, और एसोसिएटेड लक्ष्य जीन का मूल्यांकन करने के लिए एक इन विट्रो प्रोटोकॉल
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells
DOI:

09:45 min

May 21, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
  • 02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
  • 03:20Generation of a Dose-response Curve
  • 04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
  • 06:37Luciferase Assay
  • 07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
  • 08:53Conclusion

Summary

Traduction automatique

इस प्रोटोकॉल एक जांच आधारित वास्तविक समय polymerase श्रृंखला प्रतिक्रिया (पीसीआर), एक sulforhodamine बी (एसआरबी) परख, 3' untranslated क्षेत्रों (3' UTR) क्लोनिंग का उपयोग करता है, और एक luciferase परख ब्याज की एक miRNA के लक्ष्य जीन को सत्यापित करने के लिए और mirnas के कार्यों को समझने के लिए.

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