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用于研究拉帕霉素/mTOR相互作用的半定量药物亲和反应目标稳定性（DARTS）测定

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Biochimie

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A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction

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用于研究拉帕霉素/mTOR相互作用的半定量药物亲和反应目标稳定性（DARTS）测定

DOI:

10.3791/59656-v

•

00:05 min

•

August 27, 2019

•

Chen Zhang*¹, Min Cui*¹, Yazhou Cui, Aubryanna Hettinghouse, Chuan-ju Liu²

¹Department of Orthopaedic Surgery,New York University Medical Center, ²Department of Cell Biology,New York University School of Medicine

Chapitres

00:04Titre
00:47Collect and Lyse Cells
01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
03:28Western Blot Analysis
03:59Results: Rapamycin Inhibition
05:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

在这项研究中，我们通过监测蛋白质稳定性的变化和估计蛋白质-配体相互作用的亲和力，增强了DARTS实验的数据分析能力。相互作用可以绘制成两条曲线：蛋白质解解曲线和剂量依赖曲线。我们使用 mTOR-拉帕霉素相互作用作为示例案例。

Tags

DARTS Drug Affinity Responsive Target Stability MTOR Rapamycin Protein-ligand Interaction Proteolytic Curve Dose-dependence Curve 293T Cells Cell Lysis BCA Assay Pronase Protease Inhibitor Cocktail SDS-PAGE

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