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Un saggio di assenza di stasse reattiva (DARTS) di affinità dei farmaci semi-quantitativa per studiare l'interazione tra Rapamicina e mTOR
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A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction
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Un saggio di assenza di stasse reattiva (DARTS) di affinità dei farmaci semi-quantitativa per studiare l'interazione tra Rapamicina e mTOR

DOI:
10.3791/59656-v

•

00:05 min

•

August 27, 2019

•

, , , ,
1Department of Orthopaedic Surgery,New York University Medical Center, 2Department of Cell Biology,New York University School of Medicine

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:47Collect and Lyse Cells
  • 01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
  • 03:28Western Blot Analysis
  • 03:59Results: Rapamycin Inhibition
  • 05:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

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In questo studio, abbiamo migliorato le capacità di analisi dei dati dell'esperimento DARTS monitorando i cambiamenti nella stabilità delle proteine e stimando l'affinità delle interazioni proteina-ligando. Le interazioni possono essere tracciate in due curve: una curva proteolitica e una curva di dipendenza da dose. Abbiamo usato l'interazione mTOR-rapamycin come caso esemplare.

Tags

DARTSDrug Affinity Responsive Target StabilityMTORRapamycinProtein-ligand InteractionProteolytic CurveDose-dependence Curve293T CellsCell LysisBCA AssayPronaseProtease Inhibitor CocktailSDS-PAGE

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