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라파마이신/mTOR 상호 작용을 연구하기 위한 반정량적 약물 선호도 반응 형 표적 안정성(DARTS) 분석

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Biochimie

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A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction

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라파마이신/mTOR 상호 작용을 연구하기 위한 반정량적 약물 선호도 반응 형 표적 안정성(DARTS) 분석

DOI:

10.3791/59656-v

•

00:05 min

•

August 27, 2019

•

Chen Zhang*¹, Min Cui*¹, Yazhou Cui, Aubryanna Hettinghouse, Chuan-ju Liu²

¹Department of Orthopaedic Surgery,New York University Medical Center, ²Department of Cell Biology,New York University School of Medicine

Chapitres

00:04Titre
00:47Collect and Lyse Cells
01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
03:28Western Blot Analysis
03:59Results: Rapamycin Inhibition
05:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

이 연구에서는 단백질 안정성의 변화를 모니터링하고 단백질-리간드 상호작용의 친화성을 추정하여 DARTS 실험의 데이터 분석 기능을 향상시켰습니다. 상호 작용은 두 개의 곡선으로 플롯 될 수있다: proteolytic 곡선과 용량 의존 곡선. 우리는 모범사례로 mTOR-rapamycin 상호 작용을 사용했습니다.

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DARTS Drug Affinity Responsive Target Stability MTOR Rapamycin Protein-ligand Interaction Proteolytic Curve Dose-dependence Curve 293T Cells Cell Lysis BCA Assay Pronase Protease Inhibitor Cocktail SDS-PAGE

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