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1Department of Nephrology,University of Duisburg-Essen, University Hospital Essen, 2Institute for Virology,University of Duisburg-Essen, University Hospital Essen, 3Center for Translational Medicine, Medical Department I, Marien Hospital Herne,University Hospital of the Ruhr-University of Bochum, 4Department of Infectious Diseases, University of Duisburg-Essen,University Hospital Essen Hufelandstr
Chapitres
- 00:00Titre
- 01:15Collection of Blood and or Urine Samples and Isolation of BKPyV-DNA
- 02:11Amplification and Sequencing of the Non-coding Control Region (NCCR)
- 03:37Cloning of the Non-coding Control Region (NCCR) into the Dual Fluorescence Reporter
- 05:26Transient Transfection of HEK293T Cells with the Dual Fluorescence Reporter Plasmid and Treatment with Potential Antiviral Agents
- 07:23Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry
- 09:22Results and Data Interpretation
- 11:26Conclusion
इस पांडुलिपि में, एक प्रोटोकॉल एक द्विदिश रिपोर्टर प्लाज्मिड tdTomato और eGFP व्यक्त करने के साथ transfected HEK293T कोशिकाओं का उपयोग करके बीके-पॉलीओमावायरस ट्रांसक्रिप्शनल गतिविधि के FACS आधारित माप प्रदर्शन करने के लिए प्रस्तुत किया है। इस विधि को आगे मात्रात्मक वायरल प्रतिलेखन पर उपन्यास यौगिकों के प्रभाव का निर्धारण करने के लिए अनुमति देता है.
