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Detecção de atividade de retrotransposição de Hot LINE-1s por PCR inverso de longa distância
Journal JoVE
Recherche en cancérologie
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Journal JoVE Recherche en cancérologie
Detection of Retrotransposition Activity of Hot LINE-1s by Long-Distance Inverse PCR
DOI:

10:54 min

July 27, 2019

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Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:41Designing Inverse Primers and Selecting Restriction Enzymes (Bioinformatics)
  • 05:56Making Circular DNA Templates for Long-distance Inverse PCR: DNA Extraction and Quality Assessment
  • 08:29Long-distance Inverse PCR: Determining Primer Annealing Temperature by Gradient PCR
  • 10:25Representative Results of LDI-PCR
  • 11:27Conclusion

Summary

Traduction automatique

Este artigo esboça um ensaio PCR-baseado simples para monitorar a atividade de um Retrotransposão linha-1 ativo e para mapear retrotransposições de de novo em um genoma dado. Usando a linha celular MCF7, demonstramos aqui como esse método pode ser aplicado para detectar a atividade de uma linha-1 localizada em 22q 12.1.

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