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Visualizzazione del peptide batterico per la selezione di nuovi enzimi biotinylami
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Chapitres
- 00:04Titre
- 00:29Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
- 01:32Generation of a BirA Library
- 03:16Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
- 07:18Quantification of Enrichment
- 08:26Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
- 10:00Conclusion
Qui presentiamo un metodo per selezionare per nuove varianti della ligase biotina-proteina E. BirA che biotinyili uno specifico peptide bersaglio. Il protocollo descrive la costruzione di un plasmide per la visualizzazione batterica del peptide bersaglio, la generazione di una libreria BirA, la selezione e la caratterizzazione delle varianti BirA.
