/
/
Bakteriell peptid display for valg av Novel Biotinylating enzymer
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Titre
- 00:29Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
- 01:32Generation of a BirA Library
- 03:16Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
- 07:18Quantification of Enrichment
- 08:26Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
- 10:00Conclusion
Her presenterer vi en metode for å velge for romanen varianter av E. coli biotin-protein ligase BirA som biotinylates et bestemt mål peptid. Protokollen beskriver byggingen av en plasmider for bakteriell visning av målet peptid, generering av en BirA bibliotek, utvalg og karakterisering av BirA varianter.
