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Imagem de ATP intracelular em fatias organotípicas do tecido do cérebro do rato usando o sensor ateam1.03yEMK baseado em FRET
Journal JoVE
Neurosciences
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Journal JoVE Neurosciences
Imaging of Intracellular ATP in Organotypic Tissue Slices of the Mouse Brain using the FRET-based Sensor ATeam1.03YEMK

Imagem de ATP intracelular em fatias organotípicas do tecido do cérebro do rato usando o sensor ateam1.03yEMK baseado em FRET

DOI:
10.3791/60294-v

•

11:20 min

•

December 19, 2019

•

, , , , ,
1Institute of Neurobiology,Heinrich Heine University Düsseldorf, 2Department of Neurology,Düsseldorf University Hospital

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:25Preparation of Organotypic Brain Slice Cultures (OTCs)
  • 02:58Culturing the Slices
  • 04:18Removal of the Glial Scar
  • 05:20FRET-based ATP Imaging and Documentation of Cellular ATeam Fluorescence
  • 08:21Results: Visualization of Neurons and Astrocytes
  • 10:25Conclusion

Summary

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Descrevemos um protocolo para a expressão específica do tipo celular do sensor geneticamente codificado baseado em FRET ATeam1.03YEMK em culturas organotípicas do antecérebro do rato. Além disso, mostramos como usar este sensor para imagens dinâmicas dos níveis de ATP celular em neurônios e astrócitos.

Tags

Keywords: Intracellular ATPMouse BrainFRET-based SensorATeam1.03YEMKFluorescent ImagingATP MeasurementsNeuronal ATPAstrocytic ATPEnergy MetabolismIschemic StrokeHippocampal FormationSterile ConditionsPetri DishesHanks’ Salt Solution

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