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Isolamento di Microglia specifico della regione da un emisfero cerebrale di topi adulto per il sequenziamento profondo dell'RNA a singola cellula
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Journal JoVE Neurosciences
Isolation of Region-specific Microglia from One Adult Mouse Brain Hemisphere for Deep Single-cell RNA Sequencing
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Isolamento di Microglia specifico della regione da un emisfero cerebrale di topi adulto per il sequenziamento profondo dell'RNA a singola cellula

DOI:
10.3791/60347-v

•

09:49 min

•

December 03, 2019

•

,
1Department of Neurobiology,Stanford University School of Medicine

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:43Brain Region Dissection
  • 01:43Mechanical Tissue Dissociation
  • 02:40Myelin Removal
  • 04:25Staining for Fluorescence-activated Cell Sorting
  • 05:18Index FACS Sorting
  • 05:46Single-cell RNA-sequencing Library Preparation
  • 07:17Results: Isolation of Region-Specific Microglia for Deep Single-Cell RNA Sequencing
  • 09:16Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Forniamo un protocollo per l'isolamento della microglia da diverse regioni sezionate di un emisfero cerebrale adulto, seguito dalla preparazione della libreria semiautomatica per il sequenziamento profondo dell'RNA unicellulare di trascrittomi a lunghezza intera. Questo metodo aiuterà a chiarire l'eterogeneità funzionale della microglia in salute e malattia.

Tags

MicrogliaSingle-cell RNA SequencingBrain RegionsCell IsolationCell SeparationDounce HomogenizerMagnetic SeparationRNA ExtractionLibrary PreparationDeep Sequencing

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