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Isolierung von Stammzellen aus 3-dimensionalen Sphäroidkulturen
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Chapitres
- 00:04Titre
- 01:16Culture and Maintenance of HPrEC Cells in 2D
- 02:30Labeling HPrEC with BrdU, CFSE, or Far Red Pro-dyes
- 03:24Prostasphere Formation in the 3D Basement Membrane Culture System
- 04:27Isolation of the CFSE Label-retaining Prostate Stem Cells by FACS Sorting
- 06:45Results: Evaluation of the Sphere Based Label-retaining Assay
- 08:03Conclusion
Unter Verwendung menschlicher primärer Prostataepithelzellen berichten wir über eine neuartige biomarkerfreie Methode der funktionellen Charakterisierung von stammähnlichen Zellen durch einen sphäroidbasierten Labelretentionstest. Für die Beschriftung von BrdU-, CFSE- oder Far Red 2D-Zellen wird ein Schritt-für-Schritt-Protokoll beschrieben. dreidimensionale Sphäroidbildung; kennzeichnungserhaltende stammähnliche Zellidentifikation durch Immunzytochemie; isolierung durch FACS.
