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Aislamiento de células similares a tallos de cultivos esferoides tridimensionales
Journal JoVE
Recherche en cancérologie
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Journal JoVE Recherche en cancérologie
Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures
DOI:

09:06 min

December 13, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:16Culture and Maintenance of HPrEC Cells in 2D
  • 02:30Labeling HPrEC with BrdU, CFSE, or Far Red Pro-dyes
  • 03:24Prostasphere Formation in the 3D Basement Membrane Culture System
  • 04:27Isolation of the CFSE Label-retaining Prostate Stem Cells by FACS Sorting
  • 06:45Results: Evaluation of the Sphere Based Label-retaining Assay
  • 08:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

Utilizando células epiteliales de próstata primarias humanas, informamos de un nuevo método libre de biomarcadores de caracterización funcional de células similares a tallos mediante un ensayo de retención de etiquetas basado en esferoides. Se describe un protocolo paso a paso para el etiquetado de celdas 2D BrdU, CFSE o Far Red; formación de esferoides tridimensionales; identificación celular similar a un tallo que retiene la etiqueta por inmunocitoquímica; y aislamiento por FACS.

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