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Oligomerisierungsdynamik von Zelloberflächenrezeptoren in lebenden Zellen durch totale interne Reflexionsfluoreszenzmikroskopie kombiniert mit Zahlen- und Helligkeitsanalyse
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Oligomerization Dynamics of Cell Surface Receptors in Living Cells by Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy Combined with Number and Brightness Analysis
DOI:

10:43 min

November 06, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:48Sample Preparation
  • 02:38TIRF Imaging: Alignment of the Laser Line and Optimization of TIRF Illumination
  • 04:05TIRF Imaging: Capture of the Time Series
  • 05:46Number & Brightness (N&B): Quality Check of the Time Series
  • 06:34Number & Brightness (N&B): Computation of the B-values in Selected Region-of-interest (ROI)
  • 08:19Results: N&B Analysis and Kinetics of FGFR1 Oligomerization
  • 09:42Conclusion

Summary

Traduction automatique

Wir beschreiben einen bildgebenden Ansatz zur Bestimmung des durchschnittlichen oligomeren Zustands von mEGFP-getaggten Rezeptor-Oligomeren, die durch Ligandenbindung in der Plasmamembran lebender Zellen induziert werden. Das Protokoll basiert auf der Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Mikroskopie in Kombination mit der Number and Brightness (N&B)-Analyse.

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