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Identifizierung von Transkriptionsfaktor-Regulierern mit Medium-Throughput-Screening von Arrayed Libraries und einem Dual-Luciferase-basierten Reporter
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Chapitres
- 00:04Introduction
- 00:39Lentiviral Vector Library Preparation
- 01:24Packaging of the Arrayed Lentiviral Library
- 03:35Cell Infection for Screening
- 04:48Cell Seeding for Transfection of Dual-Luciferase Reporter
- 06:27Dual-Luciferase Reporter Transfection
- 07:35Dual-Luciferase Activity Quantification
- 09:02Results: Representative Arrayed Library Screening
- 10:47Conclusion
Um neue Regulatoren von Transkriptionsfaktoren zu identifizieren, entwickelten wir einen Ansatz für die Bildschirmanordnung von lentiviralen oder retroviralen RNAi-Bibliotheken unter Verwendung eines auf Dual-Luciferase basierenden Transkriptions-Reporter-Assays. Dieser Ansatz bietet eine schnelle und relativ kostengünstige Möglichkeit, Hunderte von Kandidaten in einem einzigen Experiment zu überprüfen.
