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배열된 라이브러리의 중간 처리량 스크리닝및 이중 루시퍼라제 기반 리포터를 이용한 전사 계수 조절기 식별
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Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter
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배열된 라이브러리의 중간 처리량 스크리닝및 이중 루시퍼라제 기반 리포터를 이용한 전사 계수 조절기 식별

DOI:
10.3791/60582-v

•

11:32 min

•

March 27, 2020

•

,
1Department of Molecular & Cellular Physiology,Albany Medical College

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:39Lentiviral Vector Library Preparation
  • 01:24Packaging of the Arrayed Lentiviral Library
  • 03:35Cell Infection for Screening
  • 04:48Cell Seeding for Transfection of Dual-Luciferase Reporter
  • 06:27Dual-Luciferase Reporter Transfection
  • 07:35Dual-Luciferase Activity Quantification
  • 09:02Results: Representative Arrayed Library Screening
  • 10:47Conclusion

Summary

Traduction automatique

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전사 인자의 새로운 조절자를 확인하기 위해, 우리는 이중 luciferase 기반 의 전사 기자 분석을 사용하여 배열 된 렌티 바이러스 또는 레트로 바이러스 RNAi 라이브러리를 선별하는 접근 법을 개발했습니다. 이 방법은 단일 실험에서 수백 개의 후보를 선별하는 빠르고 비교적 저렴한 방법을 제공합니다.

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Keywords: Transcription FactorMedium-throughput ScreeningArrayed LibrariesDual-luciferase ReporterLentiviral VectorRetroviral AssayBacterial Miniprep293FT CellsTransfectionPsPAX2VSVGCell Culture

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