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Detección de especies totales reactivas de oxígeno en células adherentes por 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining
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Detection of Total Reactive Oxygen Species in Adherent Cells by 2′,7′-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining
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Detección de especies totales reactivas de oxígeno en células adherentes por 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining

DOI:
10.3791/60682-v

•

04:53 min

•

June 23, 2020

•

,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of New Mexico

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:32Cell Seeding and DCFH-DA Solution Preparation
  • 01:32DCFH-DA Staining
  • 02:12Image Acquisition and Intensity Measurement
  • 03:29Results: Iron Treatment Increases ROS in Colorectal Cancer Cells
  • 04:07Conclusion

Summary

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Aquí, presentamos un protocolo para detectar especies totales de oxígeno reactivo celular (ROS) usando 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA). Este método puede visualizar la localización de ROS celular en células adherentes con un microscopio de fluorescencia y cuantificar la intensidad ROS con un lector de placas de fluorescencia. Este protocolo es simple, eficiente y rentable.

Tags

Reactive Oxygen SpeciesDCFH-DA StainingAdherent CellsFluorescence MicroscopyFluorescence Plate ReaderOxidative StressHCT116 Colorectal Cancer CellsFerrous SulfateDoxorubicinRIPA BufferBradford AssayFluorescence Intensity Quantification

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